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【求助】过硅胶柱收集到的所有馏分中没有检测到目标物，求助原因。

分离/萃取

  • 过硅胶柱层析收集了96个馏分，结果没有一个馏分检测到所需的效果的！想到以下原因：
    1、上柱前的样品是冷冻干燥后的粉末，可能这些物质在冷冻过程中丧失了活性；
    2、收集的馏分过分稀释了目标物质；
    3、在检测馏分的活性前，需要将馏分中的洗脱剂（氯仿和甲醇）旋转蒸发除去，然后用去离子水洗净蒸馏瓶的内壁，可能在此过程中损失较大；
    4、最坏的可能，目标物根本没洗下来。
    1和2两个原因已经排除，求助各位高手，要避免3这个可能，可以怎样改进除去洗脱剂的方法，保证物质不会损失？至于第4个原因，我上传几张洗脱前后的硅胶柱照片，各位高手帮忙判断下其中的物质是否洗下来了？




    是否还有其它原因？急望高手指导。
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  • dahua1981

    第1楼2011/02/22

    应助达人

    你把硅胶层抠出来用溶剂一下看看就能排除4

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  • 阿三

    第2楼2011/02/23

    楼主讲到要用去离子水洗蒸馏瓶内壁，是你的样品易溶于水吧，按经验是没洗下来，样品极性太大了，而且做分离纯化的第三种假设太牵强了，

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    第3楼2011/02/24

    依你的分析，第三一般不可能
    加大洗脱剂的极性吧，再洗洗看看怎么样
    一般是没洗下来，呵呵

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  • 阿三

    第4楼2011/02/28

    直接用甲醇冲下来就可以了

    dahua1981(dahua1981) 发表:你把硅胶层抠出来用溶剂一下看看就能排除4

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