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【求助】希望大家帮帮我

  • cissie-1986
    2011/04/09
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • 我做的是药物的分离,之前标准品一直用甲醇溶解的,因为样品本身不太溶解在水中,结果出峰就一直有特别高大的溶剂峰,样品就参杂在溶剂峰里面,之后尝试了一部分甲醇一部分水溶解,结果紧紧跟着溶剂峰一起出来就基本分不开,我看过文献,说这个药的PK值在4左右,我尝试过磷酸、硼酸、Tris的各类pH的缓冲液,实在不知道该怎么办了。
    希望大家给点建议,谢谢。
    还有我用的Agilent的仪器,紫外灯似乎坏了,大家知道test 后mix 和max在什么范围是正常的吗?用了1500Hour 了
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  • heguang

    第1楼2011/04/10

    你的buffer里面加了SDS吗?

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  • cissie-1986

    第2楼2011/04/10

    加了20-60mmol/L但是浓度高的话柱子特别容易堵,而且老断流,基线也不平整,我用的260nm的检测波长,不知道为什么甲醇总是出现特别高的溶剂峰

    heguang(heguang) 发表:你的buffer里面加了SDS吗?

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  • userwzy

    第3楼2011/04/11

    加SDS,最好滤膜过滤一下

    cissie-1986(cissie-1986) 发表:加了20-60mmol/L但是浓度高的话柱子特别容易堵,而且老断流,基线也不平整,我用的260nm的检测波长,不知道为什么甲醇总是出现特别高的溶剂峰

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  • userwzy

    第4楼2011/04/11

    还有一个问题,我认为甲醇应该没有什么紫外吸收的,你怎么会检测到溶剂峰,是不是别的东西的峰,你用的检测波长是多少?

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  • cissie-1986

    第5楼2011/04/11

    我过了0.2微米的滤膜,而且我也觉得应该没有,但是我用我的仪器单走过甲醇也有很高的紫外吸收, 按道理应该封闭了啊,不知道为什么就是有很高的紫外吸收

    userwzy(userwzy) 发表:加SDS,最好滤膜过滤一下

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  • userwzy

    第6楼2011/04/11

    建议,直接进一针甲醇,确定是否是溶剂峰,还有你用的甲醇是否污染

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  • cissie-1986

    第7楼2011/04/11

    进过甲醇,就是有溶剂峰,应该没有污染实验室别人也都用得,作的好好的,我问过工程师,说是可能是我的缓冲环境就可能出现这种溶剂峰...不知道是不是这样呢

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  • userwzy

    第8楼2011/04/11

    这个我也不知道了,换别的有机溶剂试一下吧

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  • ericwong

    第9楼2011/04/12

    甲醇在紫外会有吸收,有时也会用它测定电渗。

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  • cissie-1986

    第10楼2011/04/12

    但是我的都260nm了阿,正常不是220nm就封闭了吗?而且我的药一直在甲醇峰里存在

    ericwong(ericwong) 发表:甲醇在紫外会有吸收,有时也会用它测定电渗。

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