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【求助】柱子测定样品问题,请教大家!

  • yujingschen
    2011/04/12
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 活化酯液相分析
    我的样品极性较强,不溶于水、甲醇,溶于乙腈,该用什么色谱柱检测,正相还是反相
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  • lanpishu23

    第3楼2011/04/12

    反相直接出来的话就用正相吧

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  • 知足常乐!

    第4楼2011/04/13

    反相应该还可以的

    可以先用反相柱试试嘛

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  • yujingschen

    第5楼2011/04/13

    关于以上样品性质,我用纯乙腈作流动相,样品在4min出峰,但不稳定,主峰后面的杂质峰越走越大,样品溶剂选用乙腈,是不是乙腈不稳定,会与样品反应啊?选用乙腈作为流动相可以吗?请各位老师指导

    知足常乐!(wenshaowei-2008) 发表:反相应该还可以的

    可以先用反相柱试试嘛

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  • yujingschen

    第6楼2011/04/14

    谢各位老师的回复。

    我的样品不溶于水,紫外最大吸收波长为203nm,我采用205nm作为检测波长,曾采用乙腈:水=90:10的流动相,样品会分解成两个峰,怀疑这个酯在水中被分解,还采用乙腈:甲醇=95:5,样品还是出现双峰,考虑到样品不溶于水和微溶于甲醇,推测样品遇到水或甲醇被析出。只有在流动相是纯乙腈的条件下,峰形才基本符合要求。不知我这样推测是否正确,请老师指正。

    但是我的样品连进5针,每一针主峰后面的杂质峰面积会变大,主峰峰面积变化不大,计算其RSD值小于2,不可能是有主峰转化而来,只有杂质峰是变大的,用面积归一法计算,第一针杂质含量为1%,到第五针杂质含量变为10%。同时我的样品是稳定的,溶液放了两天再测,第一针杂质含量依然是1%,只是接下来几针杂质含量不断变大。会不会是样品的溶剂残留在柱子上?有可能是这个原因吗?

    由于以上原因,我的样品是不是不适合反相,是否要该用正相柱作,没做过正相,该怎么着手?

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