【求助】内毒素定量

可以用内毒素定量分析仪检测。

一、浊度法（Turbidimetric Technique）浊度法采用专用仪器在适当波长范围内检测凝胶反应过程中的浊度（吸收值）变化而确定供试品中内毒素含量的方法。待测样品中内毒素与鲎试剂的C因子反应，激活凝固酶，切断凝固蛋白原中特定位置的精氨肽链，肽链凝固产生凝胶，反应液浊度变化，用适当的浊度测定仪进行检测。此法操作简单、经济、灵敏度高，检测范围广，通常可在0.006-300EU/ml的范围内进行定量。 浊度法可分为终点浊度法和动态浊度法。
1. 终点浊度法
终点浊度法（Endopoint Turbidlmetric Technique）根据到达规定时间点上反应液的最终浊度值（吸光度或透过光量值）与细菌内素浓度成正比例的关系而进行测量的一种检测方法。
终点曲线特征要求：以真值作图，标准曲线至少4点，相关系数0.980以上。
2. 动态浊度法
动态浊度法（Kinetic Turbidimetric Technique）根据测定反应液到达事先设定的浊度（吸光度）值所需要的时间的对数值与细菌内毒素浓度的对数值成反比，或浊度（吸光度）变化率与细菌内毒素浓度的关系而进行定量测量的一种分析方法。
二、光度法（Chromogenic Technique）
使用人工合成产物鲎三肽（即与PNA相连的显色基因如BOC-LEU-GLY-ARG-PNA等）作为显色基质。被内毒素激活的凝固酶水解鲎三肽中的精氨酸肽链，释放出游离的对硝基苯胺（PNA），测量反应液中对硝基苯胺的吸光度值，根据吸光度值定量被测定的内毒素。通常在0.006～15EU/ml的范围内进行定量，如果试剂质量和操作水平能达到理想的要求，可以定量检测更微量的内毒素，可用于血液、体液中的微量内毒素的测定。
光度法分为终点显色法和动态显色法。
1. 终点比色法
终点比色法（Endopoint Chromogenic Technique）系根据在一定时间内游离出的PNA的量与细菌内毒素浓度C成正比进行测定的一种分析方法。PNA（黄色）的吸光度值可使用单波长（405nm）或双波长（测定波长405nm，对照波长492nm）测量，或利用游离的PNA与偶氮试剂发生反应所形成的红色偶氮兰复合物在545nm单波长或545nm对照长630nm双波长进行检测。一般可在0.006-15EU/ml范围内进行定量。通常反应液中游离的PNA（黄色）用醋酸使其反应终止，然后进行测量。终点比色法不需要特殊的专用装置。另外，可通过调整样品和LAL试剂不同配比，反应温度以及反应时间等的不同组合，而调测定灵敏度及测定范围。
2. 动态比色法
动态比色(Kinetic Chromogenic Technique)系根据游离的PNA的吸光度变化率与细菌内毒素浓度的关系（比色反应速度法Rate assay）或到达事先设定的反应液吸光度变化值所需要的时间的对数值与细菌内毒素浓度的对数值成反比例关系而进行测定的一种分析方法，使用双波长（测定波长405nm，参比波长492nm）进行检测，一般可在0.006～50EU/ml范围进行定量。
三、酶联免疫测定法(ELISA法)
ELISA法基于抗原抗体的酶联免疫测定法，目前在国外应用十分普遍，主要由外加热原质刺激巨噬细胞后产生的内热原物质如TNF IL-1等，而进行定量测定。
四、细胞分裂素测定法
细胞分裂素测定法以巨噬细胞所产生的细胞分裂素（Cytodines）作为反应指标的检查系统。人们在进行热原致热机理的研究过程中发现，热原进入人巨噬细胞（MQ）产生了许多内源性热原，即所谓的细胞分裂素（Cytokines）。它包括：肿瘤坏死因子、白细胞介素-1、白细胞介素一6和干扰素等。这些内源性热原可直接作用于中枢神经系统刺激体温中枢，从而使机体发热。基于以上的原由，有学者认为，热原的本质实际上是一类巨噬细胞（MQ）所产生的细胞分裂素类物质的总称。目前，有关Cytokines的测定研究在欧洲和日本的医药学界十分活跃，需采用放射免疫及细胞培养等方法进行测定。

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101113/2923503/
药典里有关于内毒素检测方法的章节，楼主可以看看

http://www.instrument.com.cn/download/search.asp?searchType=title&keywords=%C4%DA%B6%BE%CB%D8

上面连接里也有一些检测方法的资料。

厦门+鲎试剂厂=你要的东西