某些具有共轭双健的分子受紫外-可见光后激发后，会产生荧光。如甲苯在265 nm 激发，在285 nm发射荧光。 请问在进行有机物的吸收光谱实验时，是否要考虑荧光发射

老化验工 2011/06/12

一般不需要考虑，原因如下： （1）你做吸收光谱分析时使用的波长与发射的荧光波长通常是不同的，如果测定的波长下没有吸收光谱和荧光发射光谱峰的重叠，这种影响就不存在。 （2）如果吸收光谱和荧光光谱有部分重叠（测定波长下也有荧光的贡献），也应该是没影响的。因为由同一个物质产生的吸收光谱强度和发射光谱强度相对量是恒定的，当存在荧光发射光谱时，它又同时进入了检测器（与吸收波长太近，仍进入狭缝），则它导致的结果是使透过光强度增强了一些，换言之，使测到的总吸光度值降低了一些（因为吸收光谱是使透过光减弱了一些），但降低后的吸光度与浓度仍成线性（与示差分析原理相似），因此，是没有影响的。一种极端的情况：吸光强度与荧光强度刚好抵消，这时无论浓度怎么变，总A不变，这种极端应该非常罕见，若真遇此情况，你可以改变吸收波长，使测定波长下的荧光强度降低一些，这需要用同一溶液分别做吸收光谱曲线和荧光光谱曲线扫描来决定，荧光光度计上有此功能。至于吸收光谱与荧光光谱会不会完全重叠在一起？这是不可能的，两类光谱曲线都成镜像关系（形状相似，但波长是错开的），不会重叠。 此外，紫外吸收光谱的光源强度对于荧光分子发射荧光的光源强度而言，还是较弱，因此，即使有荧光，我想I[sub]f[/sub]也应该很弱。 （3）荧光测定时，不必考虑吸收光谱的影响，因为荧光测定是在90度方向测量的，它属于暗背景下测量，吸收光谱是在直线方向（即激发光源的光谱不会转90度弯进入荧光检测器的）。 结论：没有影响 纯属个人观点，仅供参考。