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样品和参比池一定要用一样规格的吗?

紫外可见分光光度计(UV)

  • 前日,去维修一台紫外,用户测的是DNA样品;由于样品稀少和昂贵,故,样品池采用了 10 x 2mm的微量石英池,同时参比池也采用了一样的池子。我对用户说,参比池可以使用普通的10 x 10mm的石英池。但是他们不同意我的说法,坚持说,我的方法会影响测试结果的。请大家说一说,我的做法可以行得通吗?
    备注:样品池与参比池的光程是一致的,均为10mm。并且池壁的厚度也是一致的。
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  • wanttofly

    第1楼2011/07/20

    关键是标准曲线怎么做吧,我觉得不放也可以,只不过标准曲线的公式会有差别

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  • dahua1981

    第2楼2011/07/20

    应助达人

    只要统一就可以了

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  • ybbuuyga

    第3楼2011/07/20

    厚度应该会有一定的影响吧,建议做对比。

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  • mengzhaocheng

    第4楼2011/07/20

    应助达人

    厚度是会有影响的。

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  • 夕阳

    第5楼2011/07/20

    应助达人

    请注意:标准池与微量池的光程长度是一致的,均为10mm。
    也就是说:在Abs=KCL的公式中,样品和参比侧的光程L是一致的。

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  • tutm

    第6楼2011/07/20

    可以的,见过单个微量池架,原理上也是可行的。只要样品微量池放到架子中的位置每次都一样,这才是稳定测试的关键。

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  • Spain

    第7楼2011/07/20

    看测试目的了,两个池子透光孔对仪器光斑透过率可能是不一样的。如果仅仅是根据260、280nm去测试DNA的浓度那个差别不会太大。如果是测定A值,那要看微量池透光孔的大小是不是大于仪器光斑了。

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  • tutm

    第8楼2011/07/20

    “如果是测定A值,那要看微量池透光孔的大小是不是大于仪器光斑了”
    一般比色皿开孔是大于光束的,但是微量池不会吧;这种情况其实有点类似光纤,也是部分光束被阻挡。但是这种情况下,微量池的位置定位就非常重要,少许偏离就会导致光强变化

    Spain(spain) 发表:看测试目的了,两个池子透光孔对仪器光斑透过率可能是不一样的。如果仅仅是根据260、280nm去测试DNA的浓度那个差别不会太大。如果是测定A值,那要看微量池透光孔的大小是不是大于仪器光斑了。

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  • 老兵

    第9楼2011/07/20

    应助达人

    理论上光程一样,吸光度应该一样,但同样光程的比色皿存在误差,可以通过比对检查选用在允许误差范围内的比色皿。

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  • 夕阳

    第10楼2011/07/21

    应助达人

    tu老师说的有道理!

    tutm(tutm) 发表:“如果是测定A值,那要看微量池透光孔的大小是不是大于仪器光斑了”
    一般比色皿开孔是大于光束的,但是微量池不会吧;这种情况其实有点类似光纤,也是部分光束被阻挡。但是这种情况下,微量池的位置定位就非常重要,少许偏离就会导致光强变化

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