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液相检测 标准曲线相关问题??

  • jianfkunzhong
    2011/07/27
  • 私聊

液相色谱(LC)



  • 样品主要峰和标样保留时间不一致

    分别将不同的标样梯度稀释后做了标准曲线,标样的保留时间还算稳定,其中有一个标样,第一天和第二天跑的时间差1.1min,不知道什么原因。今天跑样品的时候发现几个主要的峰的保留时间和标样相比都差零点几分钟。洗脱条件和上样量是完全一样的。把不同的标样混合起来跑过一次,保留时间和单独跑的也有差异,我的问题是:
    1 跑样品时的保留时间应该和混合标样的比较还是和每种标样单独跑的保留时间比较?
    2 保留时间的差异会不会是样品中所测物质的浓度和标样的浓度不一样造成的?
    3 样品的保留时间必须和标准品的保留时间完全一致吗,有没有一个差异范围?
    4 如果必须要一致的话,那应该采取什么办法使他们保持一致?
    麻烦老师们给出答案,学生在此先谢过老师们!
    +关注 私聊
  • dahua1981

    第1楼2011/07/27

    应助达人

    其实因为基质效应的干扰很多时候标品保留时间和样品的保留时间不会完全一致,这个也没有同一的规定吧,一般差不多0.1min就认为是一个物质

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    +关注 私聊
  • xizhi

    第2楼2011/07/27

    问题一,混合样与单样按理说都无所谓,都应该一致的,只是混合样有时候成份复杂条件不好控制,甚至会发生成份相互影响,造成出峰时间的偏差;
    问题二,浓度的差异的确会造成保留时间的不同,但如果上样体积或者浓度并不大的话,远未超过柱子载样范围,这种保留时间差异不明显的;
    问题三,完全一致肯定是不现实的,至于能接受多大的差异范围,关键取决于样品本身对分离效果的要求,但控制在0.1min以内为宜;
    问题四,室温、柱温稳定,流动相混合均匀,仪器、柱子稳定,进样前的平衡时间足够且差不多,样品进样量与体积差不多相同,样品溶解方法一致等

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