仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
1
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
生命科学仪器
>
生命科学仪器综合讨论
>
帖子详情
蛋白质标记:乳过氧化物酶法(LPO
省部重点实验室
2011/07/28
私聊
生命科学仪器综合讨论
本法反应温和,对抗原、抗体免疫活性影响小,已被广泛应用。缺点是标记率较低,一般为20~40%。
1.原理此法是利用乳过氧化物酶(Lactoperoxidase)有促进微量过氧化氢对125I-的氧化作用,生成125I+,并标记在多肽、蛋白质酪氨酸分子上。
2.方法以标记蛋白质抗原为例。
(1)反应液组成:蛋白质2~5μg溶于磷酸缓冲液10~25μl中,加入Na125i 1m Ci(10μl)、乳过氧化物酶溶液25ng(10μl)、H2O2200ng(10μl);
(2)在室温保温7min;
(3)加入H2O2200ng(10μl);
(4)过7min再加入H2O2(3μl);
(5)保温7min后,加入0.5ml、10mmol/L巯基乙醇以停止反应;
(6)10min后加入NaI载体溶液1ml ;
(7)按常规方法分离纯化。
3.注意事项
(1)LPO质量好坏,可直接影响标记率,LPO应在使用前新鲜配制,以防酶活性降低。
(2)LPO用量应小于总蛋白质用量的1%,以减少酶自身碘化而带入的放化杂质。
(3)碘化反应速率分析表明,酶的催化速度很快。
(4)碘化反应在pH4.0~8.5较宽范围内均可进行,最适pH值应依据蛋白质本身性质而定。
(5)H2O2应保持低浓度,如高于0.1mmol/L,对酶的活性将有抑制作用。
分
该帖子已被
版主-dong3626
加2积分,加2经验;加分理由:谢谢分享
相关话题
1
Biotechnol. Biofuels:葡萄糖和木糖同步利用可生产油脂
2
【有趣】Alcheringa:科学家发现远古极地恐龙足迹
3
【仪器使用】酶标仪的原理及使用方法
4
【研一时老师布置的作业,自己总结的】在线质谱仪的构造及其在发酵过程中的应用
5
【非常有趣】Hum. Reprod.:做爸爸死于心脏病可能性较低
+关注
私聊
dong3626
第1楼
2011/07/28
应助达人
不知道这种蛋白质标记有什么作用。
0
发表回复
近期热榜
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研!
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
报名开启:ICS2024第十三届光谱网络会议!
推荐收藏!盘点中药材及饮片检测解决方案
热门活动
甄选国优仪器,助推设备更新
采购咨询618活动:1000元奖励等你拿
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
【讨论】使用酶标仪时,往板井里转移样品,96个孔你需要多长时间?
2007/07/09
弱光成像或体内发光实验Atik TE科研制冷CCD相机
原创
2024/07/05
【转帖】引物设计实例分析
2007/01/19
【讨论】如何去除内毒素
2008/11/04
【科普】《科学》“长寿基因”文章终被撤销
讨论
2011/07/25
【分享】《Nature》:放松心情有助提高记忆力
2010/06/04
显微镜隔振台特点及应用
分享
2019/09/30
每周一话题——实验室摇床是什么型号的
原创
2013/06/28
【我们不一YOUNG】蛋白质浓度测定方法大全
原创
2024/07/06
【我们不一YOUNG】HTS酶抑制剂筛选的流程介绍
分享
2024/07/05
太空微重力环境下癌症药物研究系统进口航空航天随机定位微重力模拟仪AJ001X
分享
2024/07/05
弱光成像或体内发光实验Atik TE科研制冷CCD相机
原创
2024/07/05
【我们不一YOUNG】结缘仪器,一起结缘,与仪器信息网一起成长
原创
2024/07/01
心血管检测仪打开后出现ch375dll.dll电脑丢失怎么办
已应助
2024/07/01
出售贝克曼DXC800生化分析系统
原创
2024/06/21
编织袋拉力机
原创
2024/06/14
检测报告一定要有判定结果吗?
求助
2024/07/01
气相FID重现性不好原因
求助
2024/07/01
求助安捷伦GC7890B,EPC无响应解决办法
求助
2024/07/01
‘有奖问答’对错题’:用抽样方案(30,0)对产品批进行连续验收,当批不合格品率为1%时,方案的接收概率为73.97%,则平均检出质量为( )。
讨论
2024/07/05
HJ1332便携非甲实际应用问题
讨论
2024/07/01
如何做好体系工作?
分享
2024/07/01
多人主检的报告,检测审核应该怎么签字
求助
2024/07/05
EI源的灯丝镉厂家通用吗?
求助
2024/07/03
生物标记三部曲:绿色荧光蛋白、辣根过氧化物酶和小型单线态氧制造者
分享
2011/07/28
质谱学会年会,西安8.6 日程公布了
讨论
2011/07/28
CNCA-11-B15蜂蜜中氯霉素残留量能力验证检测讨论
讨论
2011/07/28
求助标准EN50354防电弧标准
已应助
2011/07/28
57铁比56铁浓度还高,大家觉得会是什么原因
讨论
2011/07/28
举报帖子“含结晶水化合物和无水化合物用红外能鉴别吗?”
2011/07/28
含结晶水化合物和无水化合物用红外能鉴别吗?
求助
2011/07/28
含结晶水化合物和无水化合物用红外能鉴别吗?
咨询
2011/07/28
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...