viscotektegent
第1楼2011/08/30
1 GPC的测试范围,与色谱柱和标样有关。选用大号柱子、大分子量标样就可以做大、超大分子量样品了,但是也要视具体情况而定,不同的聚合物,情况很复杂了。一般,像聚苯乙烯,做到几百万应该不成问题。蛋白质样品还有接近千万的呢。
2 交联或者轻度交联的样品,不适合用GPC分析,往往会堵柱子,传统上用化学方法——称重法;
3 还可以选择0.8u的过滤器;
聚苯乙烯比较好做,分子密度大、体积小,又没有交联,一般,即使是上百万分子量的,尺寸也不会超过0.45u的,顶多一、二百纳米吧。
当然,要是用场流分离仪就省事儿了,不用担心堵柱子了,轻度交联的样品,如:凝胶物质,就可以直接分析了;彻底交联的还是做不了啊,没辙。但是,一般用场流仪就不用过滤了,而且,分离无上限,不论多大分子量的样品都可以做,不过最好带上激光散射检测器。
天空
第2楼2011/09/08
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恩,其实我觉得如果用0.45的都过滤不了,那么对于现在2000万排阻限的柱子来说几乎就做不了了。在这种情况下,基本就像您所说的存在凝胶物质了,在做这种样品之前肯定得加保护柱了,否则估计得废柱子。
现在我对于场流仪还不甚了解,好像分好几种类型,目前国内最常用的是哪种呢?
abuhaier
第8楼2014/11/08
呵呵 楼主的意思是,他只有这种超大的样品啊,没有小的。
稀释也难以解决超大分子量样品分析的问题,因为对这种连0.45u过滤器都无法过滤的样品,分离跟浓度其实已经关系不大了,而是跟样品的分子量和流体力学体积有关。而且,稀释浓度过低,即使能用柱子分离了,浓度型检测器也容易检测不到信号啊!这是个现实困难,因此,不可能无限稀释的!
更换柱子也可能解决不了根本问题,因为柱子也是有分离极限的,对分子量和流体力学体积都是有极限的。
用0.45u的过滤器过滤不了的样品,溶解又很好,那么一般来说,分子量起码应该上千万了,正常的应该上亿Dalton了,呵呵。此时可以用脱机的光散射测一下重均分子量倒是可行的。对于上亿分子量的样品,GPC看来是不行了啊。