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毛细管电泳(CE)
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求教怎样稳定的将胰蛋白酶固定在毛细管内壁上?
mwa1205
2011/10/20
私聊
毛细管电泳(CE)
各位大侠,我现在在做将胰蛋白酶固定在毛细管内壁形成一个酶解微反应器,先是用NaOH将毛细管内壁活化,带上负电荷,然后让带正电荷的胰蛋白酶溶液(将酶配在Tris-HCl,同时含有20mM CaCl2 ,pH 8.0,低于酶的等电点)进入毛细管,通过静电吸引固定上酶,发现在做电泳时候酶的活性损失厉害,估计是酶慢慢的都掉下来了,于是我又在上述步骤后再加上进一定浓度的海藻酸钠,想形成海藻酸钙凝胶加固酶在毛细管内壁上的稳定性,但是发现酶的起始活性比不用海藻酸钠时候还要低很多,请问哪位大侠能帮忙给我建议一个好的方法,将酶稳定的固定在毛细管内壁上且活性能够损失比较少。谢谢了!
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