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资料/新观点：用PH 解释westernblot原理

省部重点实验室

2011/10/28

生命科学仪器综合讨论

用PH解释westernblot 原理
由于SDS是一种阴离子去污剂，能与蛋白质分子的疏水部分结合，断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构。由于此作用蛋白质被解聚为亚单位-多肽链，形成带负电荷的蛋白质---SDS胶束，降低及消除了蛋白质分子间的天然电荷差异，因此他的电泳迁移率只与分子量有关，而不再受电荷及形态的影响。
在浓缩胶中PH为6.8，而电流缓冲液PH为8.3，可将浓缩胶看为整体，那我们说以电泳液为标准的话，浓缩胶带正电，因而带负电的SDS---蛋白质胶束就易向浓缩胶迁移，又由于分离胶的PH为8.8相对于电泳液带负电，这样就形成了我们在电泳过程中看到的样在浓缩胶和分离胶交界处形成一条线的奇观！同时也解释了换电压的问题!!!!!!!同理，转印的原理也就不攻自破了。希望我的解释能解除心中的疑惑！！！！

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dong3626

第1楼2011/10/28

应助达人

新的理解。听起来蛮有道理的。

0

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五洲东方

第2楼2011/12/01

何以此种解释，貌似是对的

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