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双波长光度计是怎么工作的?

紫外可见分光光度计(UV)

  • 在最大波长处吸光度的误差最小,那双波长光度计怎么保证它的准确性?
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  • ldgfive

    第1楼2011/11/16

    应助工程师

    没有用过双波长仪器,有没有使用的,上来讲讲吧

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  • xiaowang268

    第2楼2011/11/17

    在这两个波长处,干扰组分的吸光度相等,通过差减法,可消除干扰。

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  • 夕阳

    第3楼2011/11/17

    应助达人

    楼主的问题有些交代的不是很清楚。
    是双波长的仪器还是在一个图谱上用两个波长来定性或计算?

    524990103(524990103) 发表:在最大波长处吸光度的误差最小,那双波长光度计怎么保证它的准确性?

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  • sdrbzou

    第4楼2011/11/17

    双光束分光光度计
    经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光,一束通过参比池,一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度,此比值即为试样的透射比,经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。
    双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池,还能自动消除光源强度变化所引起的误差。
    双波长分光光度计
    由同一光源发出的光被分成两束,分别经过两个单色器,得到两束不同波长1和2 的单色光;利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池,然后经过光电倍增管和电子控制系统,最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值。对于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)分析,以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下,利用双波长分光光度法,往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计,能获得导数光谱。

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  • 女人街连锁

    第5楼2011/11/18

    好,其实简单说,目的都是一样,一束光是参照物!!

    sdrbzou(sdrbzou) 发表:双光束分光光度计
    经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光,一束通过参比池,一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度,此比值即为试样的透射比,经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。
    双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池,还能自动消除光源强度变化所引起的误差。
    双波长分光光度计
    由同一光源发出的光被分成两束,分别经过两个单色器,得到两束不同波长1和2 的单色光;利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池,然后经过光电倍增管和电子控制系统,最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值。对于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)分析,以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下,利用双波长分光光度法,往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计,能获得导数光谱。

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  • 524990103

    第6楼2011/11/18

    对于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)分析,利用双波长分光光度计,往往能提高方法的灵敏度和选择性。

    其中浑浊试样的浑浊程度对待测物质有没有影响呢?如果很浑,还有多种混合物,而待测物相对比较少。这样的结果是否可靠呢?

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  • 524990103

    第7楼2011/11/18

    在测试的时候,每个待测物质都有其最大吸收波长,而在选择波长的时候要考虑到两个波长在干扰物的吸收是一样的,又要考虑到待测物对两个波长的吸收强度差较大。那波长是怎么选择的?还有怎么保证结果的准确性?
    不知道说的是否清楚

    夕阳(anping) 发表:楼主的问题有些交代的不是很清楚。
    是双波长的仪器还是在一个图谱上用两个波长来定性或计算?

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  • 夕阳

    第8楼2011/11/18

    应助达人

    我明白了。楼主说的是双波长双光束的仪器。
    双光束双波长的仪器与双光束单波长的仪器有这本质上的不同,双光束双波长的仪器的确适合于混浊液的测试,这其中的道理就是:混浊液的待测物质与背景物质的吸收波长有着很大的差别,如果不加以彻底扣除背景的影响就会使待测物质的可信度大打折扣。而双光束单波长的仪器不能很好的完成这一工作。
    目前市面上,双光束双波长的仪器很少见到了,以前日立有一款仪器是这种类型的,型号为557型,估计目前很少有人使用啦!在我的记忆中,中科院理化技术研究所和上海医科大学各有一台557型的仪器。
    这款仪器的外形图见下面所示:

    524990103(524990103) 发表:在测试的时候,每个待测物质都有其最大吸收波长,而在选择波长的时候要考虑到两个波长在干扰物的吸收是一样的,又要考虑到待测物对两个波长的吸收强度差较大。那波长是怎么选择的?还有怎么保证结果的准确性?
    不知道说的是否清楚

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  • shenghuo0903

    第9楼2011/11/20

    一束通过参比池,一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度,此比值即为试样的透射比,经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。

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  • mengzhaocheng

    第10楼2011/11/20

    应助达人

    相当于两束平行光。克服光强随时间的波动。

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