被追杀的狼
第1楼2011/11/29
检测器
(1).紫外光度检测器
它的作用原理是基于被分析试样组分对特定波长紫外光的选择性吸收,组分浓度与吸光度的关系遵守比尔定律。最常用的检测器,应用最广,对大部分有机化合物有响应。
特点:
a.灵敏度高:其最小检测量10-9g·mL-1,故即使对紫外光吸收很弱的物质,也可以检测;
b. 线性范围宽;(比尔定律)
c. 流通池可做的很小(1mm × 10mm ,容积 8μL);
d. 对流动相的流速和温度变化不敏感可用于梯度洗脱;
e. 波长可选,易于操作:如,使用装有流通池的可见紫外分光光度计(可变波长检测器)。
缺点:对紫外光完全不吸收的试样不能检测;同时溶剂的选择受到限制。
(2). 光电二极管阵列检测器
紫外检测器的重要进展;阵列由1024个光电二极管阵列,每个光电二极管宽仅50μm,各检测一窄段波长。如图所示,在检测器中,光源发出的紫外或可见光通过液相色谱流通池,在此流动相中的各个组分进行特征吸收,然后通过狭缝,进入单色其进行分光,最后由光电二极管阵列检测,得到各个组分的吸收信号。经计算机快速处理,得三维立体谱图。
(3).荧光检测器
荧光检测器是一种高灵敏度、高选择性检测器。
对多环芳烃,维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应。
荧光检测器的结构及工作原理和荧光光度计相似。
(4).差示折光检测器
除紫外检测器之外应用最多的检测器。
差示折光检测器是借连续测定流通池中溶液折射率的方法来测定试样浓度的检测器。溶液的折射率是纯溶剂(流动相)和纯溶质(试样)折射率乘以各物质的浓度之和。因此溶有试样的流动相和纯流动相之间折射率之差表示试样在流动相中的浓度。
(5).电导检测器
其作用原理是根据物质在某些介质中电离后所产生电导变化来测定电离物质含量。
happy爱米粒
第3楼2011/11/29
维护太多了
环境:HPLC的日常操作条件:温度:10~30℃;相对湿度<80%; 最好是恒温、恒湿,远离高电磁干扰、高振动设备,有良好的通风设施。
用水:1 专门的纯水机或超纯水机;
2 去离子水重蒸;
3 二次或三次重蒸水;
4 采用类似家用的纯水机;
5 市场上瓶装的纯净水或蒸馏水;
6 其它途径;
不管采用何种途径,配制流动相应用新鲜水,水质越高放置时间越短。
理想的HPLC用水应为18.2Ω的超纯水,并通过0.22um的滤膜,除去热源、有机物、无机离子及空气等。
六通阀:
进样样品要求无微粒和能阻死针头及进样阀的物质,样品溶液均要用0.45μm的滤膜过滤。防止微粒阻塞进样阀和减少对进样阀的磨损。为防止缓冲盐和其它残留物质留在进样系统中,每次结束后应冲洗进样器,通常用不含盐的稀释剂、水或不含盐的流动相冲洗,在进样阀的Load和Inject位置反复冲洗,再用无纤维纸擦净注射器针头的外侧。
泵:使用流动相尽量要清洁;
进液处的砂芯过滤头要经常清洗;
流动相交换时要防止沉淀;
避免泵内堵塞或有气泡;
每次分析结束后,要反复冲洗进样口,防止样品的交叉污染;
色谱柱:柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动;
当柱子和色谱仪联结时,阀件或管路一定要清洗干净;
要注意流动相的脱气;
避免使用高粘度的溶剂作为流动相;
进样样品要提纯;
严格控制进样量;
每天分析工作结束后,要清洗进样阀中残留的样品;
每天分析测定结束后,都要用适当的溶剂来清洗柱;
若分析柱长期不使用,应用适当有机溶剂保存并封闭;
光源:在分析前、柱平衡得差不多时,打开检测器;在分析完成后,马上关闭检测器。
样品池要保养
chen0829
第6楼2011/11/30
能测的项目好多啊