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技术讨论,谢绝灌水。极大吸光度溶液的直接测定。

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  • 引:

    感谢savedown老师对我的“药品配液罐与光纤光谱仪的结合”帖子的回应:

    “这是一个极大吸光度问题。 首先在吸光度概念上大家要清楚,例如10A,是个什么概念? 也就是透光率为10的-10次方,也就是此溶液在此浓度下是不透光的。 如果采用重复稀释也是不可取的,如果10A的溶液要稀释到1A稀释10的4次方倍,这中间的误差是惊人的。 采用微量程的方法也不可能。所以要转变思路。 光谱的波形实际上是统计概率密度曲线, 如果在通常吸光度下,吸光度趋近于零的地方,在强度很大的地方,其响应值就不会为零。 也就是强度大,峰的底部会变宽,峰宽和峰高成函数关系(具体的可以去看概率论的有关章节)。 如果峰高不可测,测量峰宽也能大致定量,这就是简单的原理。 这个东西在标准的分析教科书不会告诉,如果按照教科书和药典的做法,可以明确说此问题无解。 如果要解决问题,还希望把问题描述到位一些。 例如此溶液中是否有悬浮物?是否浑浊等等。 另外补充一句目前各品牌的光纤光谱仪在吸光度大于3的时候,数据都不太可信了。

    如果只有水和组分,只关心组分浓度,可以不用关心峰顶在哪里。 可以作峰底的关系。

    具体的说峰底的关系就是,确定一个吸收强度,记录浓度和该强度对应的波长位置,建立标准曲线,也可以对极高吸光度的物质进行定量。

    前提假设是物质光的吸收基于相同的统计分布,如果统计分布未改变,那么同样强度的吸收会沿着统计分布曲线前伸或回撤,实际上不是直线,而是一条曲线,在浓度范围内,可视作直线使用。

    化学计量学方法与分子光谱分析技术/褚小立/ 可以看看,里面谈得比较多。”
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  • tangtang

    第1楼2012/01/10

    我大概了解了,就是假设254nm处是最大吸光度的位置,吸光度为4000A(1cm比色皿),但是在比如360nm处,吸光度大幅降低,在可测试的范围。

    问题就是:重复性如何?

    一般认为在峰顶测试,波长稍微偏差,数据变化不大,但在峰陡峭的位置,波长稍微偏差,数据就差得远了。

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  • tangtang

    第2楼2012/01/10

    但是再经仔细研读后,发现savedown老师讲的是峰宽测定?

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  • zwyu

    第3楼2012/01/11

    这个用单一波长恐怕不行,多元变量的化学计量学可能有戏。

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  • tangtang

    第4楼2012/01/11

    这样的溶液,有没有办法直接测定,RSD能不能做到不超过2%?

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  • dahua1981

    第5楼2012/01/11

    应助达人

    博士不是说吸光度大于3数值就可疑了吗
    大于10更不可信了吧

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  • dahua1981

    第6楼2012/01/11

    应助达人

    4000a?
    确实太大了

    tangtang(tangtang) 发表:我大概了解了,就是假设254nm处是最大吸光度的位置,吸光度为4000A(1cm比色皿),但是在比如360nm处,吸光度大幅降低,在可测试的范围。

    问题就是:重复性如何?

    一般认为在峰顶测试,波长稍微偏差,数据变化不大,但在峰陡峭的位置,波长稍微偏差,数据就差得远了。

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  • tangtang

    第7楼2012/01/11

    如果是双通道的设计呢?

    一个通道测定已知浓度的对照溶液,另一个通道测定待测溶液?

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  • happy爱米粒

    第8楼2012/01/11

    tangtang老师好像对2%这个数字情有独钟哦[url=javascript:void(0);][/url]

    tangtang(tangtang) 发表:这样的溶液,有没有办法直接测定,RSD能不能做到不超过2%?

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  • tangtang

    第9楼2012/01/11

    欢迎木老师参与讨论。

    药典的高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相的重复性要求,是RSD2%,含量测定要求,是98-102%,我认为2%的偏差,属于仪器偏差,很难控。但高于2%以上的部分,要尽量降低。特别是要以测得溶液的含量折算装量的,误差大了的话,整批装量不合格就全报废了。

    木有才(xgy2005) 发表:tangtang老师好像对2%这个数字情有独钟哦[/url]

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  • happy爱米粒

    第10楼2012/01/11

    原来如此,呵呵,了解,我们做食品的一般要求RSD<15%就可以了

    tangtang(tangtang) 发表:欢迎木老师参与讨论。

    药典的高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相的重复性要求,是RSD2%,含量测定要求,是98-102%,我认为2%的偏差,属于仪器偏差,很难控。但高于2%以上的部分,要尽量降低。特别是要以测得溶液的含量折算装量的,误差大了的话,整批装量不合格就全报废了。

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