提问帖（3.9）：在制备色谱中，影响回收率的因素有哪些？

制备色谱中，影响回收率的因素

高效液相色谱回收率如何计算

做加标回收
样品加标回收：相同的样品取两份，其中一份加入定量的待测成分标准物质；两份同时按相同的分析步骤分析，加标的一份所得的结果减去未加标一份所得的结果，其差值同加入标准物质的理论值之比即为样品加标回收率。 　　
加标回收率的测定, 是实验室内经常用以自控的一种质量控制技术.
对于它的计算方法, 给定了一个理论公式： 　　
加标回收率= (加标试样测定值－试样测定值)÷加标量×100%.

举例——温度太高了，40度水浴，会变性，如果可能的话，可以选择用旋转蒸发蒸干。这样就可以提高回收率了。抗生素本身就不稳定，时间长了标准品的浓度都会有变化。所以最好是当天处理的当天进样，放置也会影响回收率的。

不同批次的小柱最好用相同的方法做几次试验，看一下小柱的批次稳定性

液相 绝对回收率和相对回收率
　　(一)用于评价样品和内标等的回收程度，一般用绝对响应(峰面积或峰高)直结计算，与方法的灵敏度很相关。

　　绝对回收率：考察测定结果与“真值”的接近程度，从生物样本基质中回收得到目标物质的响应值除以纯标准品产生的响应值即为分析物的绝对回收率。应选用高、中、低三种浓度分别进行考察，绝对回收率一般要求在50%~80%(这个数值范围书上是这么写的，不过，个人认为接近100%更好，太低的话，比如说20%等，可能方法就不容易建立，此时，应更投提取体系，或者是采用反提法等)。

　　提取回收率：空白基质中定量加入药物，经处理后与空白基质处理后加入相同量药物的比值。绝对回收率与提取回收率的关系：

　　绝对回收率=提取回收率 / (1-基质效应)

　　对于液相色谱等而言，基质效应为0，此时，绝对回收率等于提取回收率。

　　(二)用于评价方法的准确度，等同于相对偏差的作用，用测定所得浓度结果去计算。

　　相对回收率(又称方法回收率)，从生物样本基质中回收得到目标物质的响应值除以加入到生物基质中已知量的标准品产生的响应值即为分析物的相对回收率。该评价指标已扣除了目标药物在样品的前处理过程损失而造成的系统误差。高、中浓度点测得的相对回收率应在85~115%，低浓度(定量限)应在80~120%。

　　回收率的具体操作

　　绝对回收率：空白基质中定量加入药物经处理后所测得峰面积 / 与基质相同体积水(血浆等我们一般用水代替)处理后加入相同量药物所测得峰面积*100%

　　提取回收率：空白基质中定量加入药物经处理后所测得峰面积 / 空白基质处理后加入相同量药物所测得峰面积*100%

　　基质效应：(1-空白基质处理后加入相同量药物所测得峰面积 / 与基质相同体积水(血浆等我们一般用水代替)处理后加入相同量药物所测得峰面积*100%)

　　上面三者知道其二，也可以用下面的公式计算剩余的：绝对回收率=提取回收率 / (1-基质效应)

　　相对回收率：测定浓度 / 标矢浓度

应助达人

回答的够快的，很全面啊。