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毛细管电流降低

  • rosemarinus
    2012/04/19
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毛细管电泳(CE)

  • 诸位大侠,本人做手性拆分,条件已经摸好,隔了半个月再做,完全重现不出来,管子重新活化过,也用缓冲平衡管子30min,原来对映体的两个峰,现在就剩一个。想想只能换管子,问题就又来了,电流本来是60微安左右,现在电流很稳,但是降到25微安了,样品峰没有拆分开,而且峰很小。问题到底出在哪里呢,要崩溃了,各位高手来出出主意吧...
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  • nini2006

    第1楼2012/04/19

    毛细管停用那么长时间应该在停用前处理后再放置,比如将管干燥等。对于你目前的问题,建议把缓冲溶液重新配置再试试。

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  • rosemarinus

    第2楼2012/04/20

    嗯 停用前已经处理了。缓冲是新配的,样品什么的应该没问题。我用的手性拆分剂是 国产的牛黄胆酸钠,请问会不会是这个的问题呢?

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  • rosemarinus

    第3楼2012/04/20

    对了,电流问题已解决,但是峰的问题还是不行,现在我用不同PH的缓冲再次试,奇怪的是,PH不同还能走成一样的,并且也都是一个峰,另个对映体还是没出现...

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  • nini2006

    第4楼2012/04/20

    这就是CE为什么不能像HPLC那么普及的原因了,太容易受影响,一点点条件的改变都有可能引起新的问题。一般换了新管子,很难走得跟原来一模一样。另外配溶液什么的都要注意,有时候就是一点点疏忽就会造成重复不出来。你说pH不同还能走得跟原来一样,那有可能是你pH测得有问题。pH的测量其实要还满高的,每次测量你都要保证温度探针都用,用之前要校准等,不然就会导致测量不准确

    rosemarinus(rosemarinus) 发表:对了,电流问题已解决,但是峰的问题还是不行,现在我用不同PH的缓冲再次试,奇怪的是,PH不同还能走成一样的,并且也都是一个峰,另个对映体还是没出现...

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  • nini2006

    第6楼2012/04/20

    如果原来能分来现在不能分开,你怀疑是牛黄胆酸钠的问题,会是什么问题?不稳定?溶液配久了会变质?那重新配就行了呗。

    rosemarinus(rosemarinus) 发表:嗯 停用前已经处理了。缓冲是新配的,样品什么的应该没问题。我用的手性拆分剂是 国产的牛黄胆酸钠,请问会不会是这个的问题呢?

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  • rosemarinus

    第7楼2012/04/20

    谢谢楼上及时的答复,可是都重新配了啊

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  • nini2006

    第8楼2012/04/20

    再重新优化条件吧,CE就是比较坑爹~

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  • rosemarinus

    第9楼2012/04/21

    感谢您的指点,这毛细管太折磨人了...

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  • ericwong

    第10楼2012/04/27

    这个问题现在解决了吗?

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  • rosemarinus

    第11楼2012/04/27

    嗯,前几天已经重现出来了,但又出现新问题了

    ericwong(ericwong) 发表:这个问题现在解决了吗?

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