梯度洗脱HPLC法测定化妆品中9种防腐剂的含量

省部重点实验室

2012/05/09

私聊

化妆品检测

梯度洗脱HPLC法测定化妆品中9种防腐剂的含量

[摘要] 目的：同时测定化妆品中9种防腐剂。方法：采用AcCN／0．05 mol／L NaH2PO (pH=3．5)作流动相的高压梯度测定。结果：操作简便，精密度和准确度符合测定要求。结论：本法具有快速、准确等特点，能满足卫生监督检测的需要。
[关键词】高效液相色谱法；化妆品；9种防腐剂

本文对化妆品中9种防腐剂的梯度HPLC测定方法进行了探讨，与现行的国家规范方法比较，采用uV检测器，可大量节省分析时间和仪器使用成本，并提高了检测灵敏度和敏感度，更易于推广使用。

l 材料与方法

1．1 仪器与试剂
1．1．1 实验仪器LC一10ADVP HPLC(LC一10ADVP泵；SIL一10ADVP自动进样器；SPD一10AVP紫外检测器；CTO一10AVP柱温箱；DGU一12A在线脱气机；SCL一10AVP系统控制器，Class VP 6．03色谱工作站。Shimadzu JAPAN)。
1．1．2 试剂与标样已睛(HPLC级)；NaH2PO4(AR)、水：双重蒸馏水；标准样品(Ehrenstorfer Gmbh)：准确称取9种防腐剂标准品，用甲醇配制成如下浓度：(出峰顺序)① 溴硝丙二醇130．0ug／ml；② 苯甲醇130．0ug／ml；③ 苯氧基乙醇25．0ug／ml；④尼泊金甲酯1．0ug／ml；⑤ 苯甲酸10．0 ug／ml；⑥尼泊金已酯1．0ug／ml；⑦尼泊金丙酯1．0ug／ml；⑧尼泊金异丁酯1．0ug／ml；⑨尼泊金丁酯1．0ug／ml。
1．2 色谱测定条件
色谱柱：HyperSIL—Cl8 4．6×250 mm 5 um(Thermo)；流动相：AeCN／0．05 mol／L NaH2PO4(pH=3．5)；洗脱方式：高压梯度洗脱；流速：1．0 ml／min；柱温：40℃ ；检测波长：254 nm。
1．3 样品处理
精确称取待测样品0．5 g于10．0 ml比色管中。用甲醇稀释到刻度，剧烈振摇l min，超声萃取5 min，取上清液经0．45 um有机膜过滤后测定。

2 结果与讨论
2．1 分离条件的选择
我们用AeCN／0．05 mol／L NaH：PO (pH=3．5)作流动相。采用高压梯度的洗脱方式，对9种防腐剂分离条件进行了选择。结果表明9种组分的分离度完全符合日常测定的要求，同时作空白实验未见任何干扰。
2．2 色谱柱平衡时间
色谱柱平衡时间对9种组分的分离至关重要，如果采用“专柱专用”的用柱方式，平衡时间仅用30 min即可，否则大约需要2．5 h的平衡时间。
2．3 标准曲线及线性范围
在上述条件下测定9种组分的线性，以峰面积(UV．s)为纵坐标，以浓度(ug／m1)为横坐标作图，并计算其回归方程。结果证明9种组分在一定的浓度范围内线性良好。
2．4 方法回收率、精密度及最小检测浓度(C最小)
在0．5 g样品中分别添加两种浓度的标准样品，按“1．3”项处理，测定其精密度、准确度及C最大、。结果证明其回收率、精密度、C最小均可满足定量分析的要求。
2．5 干扰试验
在实验条件下，分别测定柠檬黄、笕菜红、胭脂红、栀子黄、日落黄等五种色素，发现胭脂红对溴硝丙二醇有干扰，提示在测定溴硝丙二醇防腐剂时化妆品检样中不能含有胭脂红。
2．6 样品实测
在测定条件下，对部分市售的膏霜类化妆品中9种防腐剂含量进行了实测。