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SPE常见问题解答

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  • SPE常见问题解答

    问题

    可能的原因

    解决方法

    回收率低



    柱活化条件不恰当





    根据固定相的不同正确活化SPE小柱

    反相填料:甲醇、乙腈等,1倍柱管体积或3倍柱床体积

    正相填料:非极性有机溶剂如正己烷等,1倍柱管体积或3倍柱床体积

    离子交换填料:1倍柱管体积的甲醇、乙腈或异丙醇等与水互溶的极性溶剂。



    样品溶剂对目标成分的作用力比固定相强



    选择对目标组分具有更强选择性的SPE小柱;

    调整样品溶剂的PH值,增加目标组分在固定相中的作用力;

    改变样品溶剂的极性,降低目标组分在溶剂中的作用力。



    清洗溶剂选择不当;

    洗脱能力太强



    使用正确的清洗溶剂;

    选择洗脱能力更弱的溶剂



    载样时流速过快



    重力自然载样或控制载样流速1ml/min



    SPE小柱太小



    用更大规格的SPE小柱;

    用选择性更强的SPE小柱;

    用载样量更大的SPE小柱



    洗脱前SPE小柱清洗溶剂抽干不充分



    充分抽干冲洗溶剂





    洗脱不充分



    增加洗脱剂的体积;增加洗脱剂的强度;用更小规格的SPE小柱



    洗脱时流速过快或过慢



    控制流速1-2ml/min

    目标成分不能从SPE小柱上洗脱



    固定相对目标组分选择性太强



    选择对被分析物保留较弱的小柱;

    选择洗脱能力更强的洗脱溶剂。对酸碱目标成分,调节洗脱剂的PH值,减弱固定相对目标组分的选择性



    SPE小柱规格太大



    增加洗脱剂的用量;

    用更小规格的SPE小柱



    洗脱剂用量不足



    增加洗脱剂



    洗脱时流速过快或过慢



    控制流速1-2ml/min



    洗脱剂洗脱能力太弱



    调节洗脱剂的PH值,提高溶剂对目标成分的洗脱能力(对酸、碱目标成分);

    改变洗脱液的极性,提高溶剂对目标成分的洗脱能力

    重现性差



    上样前柱床干涸



    重新活化SPE小柱



    超出小柱的载样能力



    减小载样量,或用规格更大的SPE小柱



    载样过程流速过高



    降低流速,重力自然载样或控制载样流速1ml/min



    清洗溶剂洗脱能力太强



    降低清洗溶剂洗脱强度



    洗脱流速过快



    先让洗脱液渗透小柱,再对小柱抽真空或加压,控制流速1-2ml/min

    洗脱剂分两次加入



    洗脱剂用量不足



    增加洗脱剂的用量或者用更小规格的SPE小柱



    干扰物清洗不干净



    固定相对干扰物的选择性太强



    选择合适的清洗液,有选择性的将干扰物清洗掉

    选择对目标组分专属性更强的SPE小柱



    固定相残留的干扰物



    活化前先用洗脱剂清洗SPE小柱

    操作过程流速过低



    样品中含有过多的颗粒物质



    载样前过滤或离心样品溶液或改用溶解能力更强的样品溶剂



    样品溶液粘度过大



    使用洗脱力弱的溶剂稀释样品或改用溶解力更强的样品溶剂



    真空度不够



    检查萃取装置的密封性,检查泵是否正常工作,增加真空度

    样品量过大



    样品量大于萃取小柱的载样量



    采用规格更大的SPE小柱

    萃取效率差,失败



    方法选择错误



    选择具有不同萃取模式的固定相或采用其他分析方法



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  • happy爱米粒

    第1楼2012/05/13

    样品量大于萃取小柱的载样量,这个到底怎么计算?

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  • dahua1981

    第2楼2012/05/14

    应助达人

    我也不知道如何计算

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  • 省部重点实验室

    第3楼2012/05/25

    谢谢分享 ( ⊙ o ⊙ )啊!

    学习学习

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  • dahua1981

    第4楼2012/05/25

    应助达人

    又好动西大家分享嘛

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  • butter

    第5楼2012/05/25

    不管怎样,还是谢谢楼主了。

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  • dahua1981

    第6楼2012/05/26

    应助达人

    不客气应该的

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  • yifan1117

    第7楼2012/05/31

    是经常使人混淆的一点--任何特殊的固相萃取柱在进行处理时,上样量的大小并不取决于样品的体积,而是取决于被固相萃取填料保留的样品中混合物总量。详情参见“交换能力”中各填料的说明。

    例如,所有的硅胶型填料都具有1%的吸附能力,一个500mg的C18填充床可以保留5mg的 化合物。要注意的是C18吸附的并不只是所期望的分析物而是样品中所有的物质。

    木有才(xgy2005) 发表:样品量大于萃取小柱的载样量,这个到底怎么计算?

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  • yifan1117

    第8楼2012/05/31

    问题十五

    请问:在检测过程中,我们不知道样品含量,个别样品含量非常高,不知道的情况下,过SPE柱后,目标物会损失,这时,如何判断SPE柱过载了?

    回答:固相萃取柱给出了吸附容量,如果某个样品的浓度较高,您用浓度乘以定容体积得到样品的绝对质量,用这个绝对质量与吸附容量进行对比,如果两者比较接近,建议您减少样品量重新提取、SPE净化、分析,拿测试结果与第一次测试的纸进行对比,如果第二次的值明显增大就能断定是过载了。

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  • yifan1117

    第9楼2012/05/31

    问题十七

    我刚刚看了萃取柱的规格,好像最大上样量都很小啊?最大的才50mg,这个上样量是指包括溶剂一起的还是只有目标物的量?

    回答:这个量指的是目标化合物+部分干扰物的量,不包括溶剂的量。虽然SPE对目标化合物具有选择性,但仍会保留部分杂质。目前多数固相萃取柱的规格比较适合农药兽药残留分析、环境监测、药物代谢、毒物检测,由于这些样品中目标化合物的浓度处于μg/L ~ mg/L之间,所以根本不必担心过载。如果有更大量的需求可以提出定做。

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  • happy爱米粒

    第10楼2012/05/31

    这个1%的吸附量不是确定的吧?不同类型的填料是否相同?

    yifan1117(yifan1117) 发表:是经常使人混淆的一点--任何特殊的固相萃取柱在进行处理时,上样量的大小并不取决于样品的体积,而是取决于被固相萃取填料保留的样品中混合物总量。详情参见“交换能力”中各填料的说明。

    例如,所有的硅胶型填料都具有1%的吸附能力,一个500mg的C18填充床可以保留5mg的 化合物。要注意的是C18吸附的并不只是所期望的分析物而是样品中所有的物质。

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