做辣椒粉苏丹红检测时遇到的问题

苏丹红检测套装：



固相萃取柱：HiCaptSudan苏丹红专用柱(500mg/3mL，订货号：22-05003)



液相色谱柱：HiSepC18-T 150 mm×4.6 mm i.d., 5 μm（订货号：0246150）



苏丹红是偶氮苯类人工色素,由于苏丹红具有潜在的致癌性, 中国和欧盟等多数国家都禁止其作为色素添加剂在食品中使用。然而, 仍有不少食品生产企业为了改善食品色泽、降低成本将其作为食用色素。我国质量监督部门检出了包括几家知名企业生产的众多含有苏丹红的食品, 引起了整个社会的关注。因此，建立快速可靠的检测方法至关重要。



目前报道的苏丹红的检测方法主要是采用液相色谱法。由于辣椒油、辣椒粉等食品成分复杂,液相色谱分离困难,易导致假阳性结果。国家标准的方法是采用正已烷作为萃取溶剂，用氧化铝固相萃取柱净化样品。但该方法样品处理过程复杂，而且氧化铝的活性不易控制，方法回收率难以得到保证。因此我们开发了HiCapt Sudan苏丹红专用固相萃取柱，建立了同时检测食品中四种苏丹红的高效液相色谱分析方法，较好地解决了这一问题。





方法的优势：



· 专利创新的苏丹红专用萃取填料，有效去除食品中的天然色素和植物油等杂质干扰



· 回收率稳定、重现，克服了传统方法中氧化铝活性不稳定的缺陷



· 方法简单、快速、节省溶剂



· 优化的色谱分离条件，有效去除杂质干扰



1. 样品处理：



1.1 样品提取：（参考国标GB/T 19681—2005）



1.1.1辣椒粉等粉状样品



称取0.5 g（准确至0.001g）样品于三角瓶中，加入5mL正己烷，超声10min，5000r/min离心5 min后取上清液3 mL，待净化。



1.1.2辣椒油等油状样品



称取0.5 g（准确至0.001g）样品于小烧杯中，加入3mL正己烷溶解，涡旋1分钟混匀，待净化。



1.1.3腊肠样品



将腊肠切成小丁，称取3.0 g, 放入10 mL离心管中，加入5 mL正己烷，超声10分钟，然后步骤同辣椒粉样品。



1.1.4番茄酱、甜辣酱样品



称取番茄酱1g，加入1 mL水，再加5 mL正己烷/丙酮（3/1，v/v），涡旋3分钟，超声10分钟，接着10000r/min离心5分钟，取上层有机相3 mL，加无水硫酸钠0.5 g，涡旋0.5分钟，静置取上清液作为上样液。



1.2固相萃取柱净化：HiCapt Sudan苏丹红专用柱(500mg/3mL)



（1）活化：在HiCapt Sudan柱中依次加入3mL丙酮，2 mL正己烷活化。



（2）萃取：将待净化液加入HiCapt Sudan柱中（在柱中正己烷液面为2mm时上样，此过程不要使柱干涸），再用200μL正己烷淋洗样品管，一并加入SPE柱中。流出液弃去。



（3）清洗：待上样液完全流出后，用2mL的3%异丙醇-正己烷溶液淋洗，淋洗液弃去，将小柱抽干。



（4）解吸：3mL丙酮解吸，收集解吸液。



（5）吹干及定容：解吸液50℃氮气吹干，加入1mL丙酮溶解并定容，用0.45μm有机滤膜过滤后HPLC分析。



2.色谱条件：



色谱柱：HiSep C18-T(150 mm×4.6 mm i.d., 5 μm)；



流动相：流动相A：0.3%甲酸的水溶液：乙腈=85:15，



流动相B：0.3%甲酸的乙腈溶液：丙酮=80:20；



流速：1mL/min



柱温：35℃



检测波长：520nm



进样量：10μL



梯度洗脱，梯度条件见下表：

表1线性回归方程、检测限LOD及定量限LOQ

表2.方法的回收率和日内、日间精密度

表3咸鸭蛋、腊肠、辣椒油中苏丹红的回收率