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关于碱性流动相下色谱柱残留问题讨论,欢迎发表独到见解

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  • 常常进行HPLC or LCMS方法开发的朋友们,在方法开发过程中,你们是否遇到这样的情况:一些化合物在酸性流动性中峰型很难看,在碱性条件下峰形漂亮,但是残留很大 ?遇到这样的情况,大家通常如何解决的?希望大家能够把自己遇到的这类情况写出来和大家分享分享,下面我谈谈我遇到这样问题的解决方案,全作抛砖引玉……呵呵
    上次做了个化合物,结构式中含有好几个N,在酸性条件下,(A相:0.1%FA in H2O B相:0.1%FA in ACN, 色谱柱 : Phenomenex Kinetex C18 50*2.1 mm,2.6 μm Or 其他C18柱,苯基柱 )色谱峰几乎就是一团,不成峰型。在碱性条件下,(A相:0.1%NH3.H2O in H2O B相:0.1%FA in ACN, 色谱柱 : Phenomenex Gemini C18 4.6*50mm 5μm)色谱峰形很完美,可惜残留非常大。最后解决方案:在酸性条件下,(好像是加了酸性离子对试剂DBAA, 色谱柱 :Agilent Zorbax Extend C18 5µm, 2.1 * 50mm),然后柱温加到55℃,从那一团色谱峰中分离出一些杂质,这才完成方法开发。
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  • arvid2007

    第1楼2012/05/26

    这样残留在色谱柱里面,会不会对后面的分析有所干扰呢,如果用酸性条件,会不会对色谱柱也有影响

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  • ruan5058

    第2楼2012/05/26

    不是说碱性的东西可以减尾嘛??

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  • arvid2007

    第3楼2012/05/26

    减尾,这个是什么意思啊?

    ruan5058(ruan5058) 发表:不是说碱性的东西可以减尾嘛??

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  • xue2009

    第4楼2012/05/28

    楼主说的在酸性流动相条件下不成峰型的原因是:目标物上的N原子结合质子带上正电荷,这样极性增大,因而在反相柱没有较好的保留效果,因而峰型变差;而在碱性流动相条件下具有较好的峰型原因是:碱性条件抑制了N原子结合质子的能力,因而目标物以分子形式存在,使得在分离过程中能够得到较好的峰型。但由于硅羟基的次级保留作用导致目标物的残留比较大,所以这些目标物适合在酸性条件下加阳离子对试剂分离。

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  • dahua1981

    第5楼2012/05/28

    应助达人

    柱子也有酸碱性啊
    如果不匹配肯定是分离不好的

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  • yangmumayi

    第6楼2012/05/28

    柱子也有酸碱性是怎么个理解呢 戴安的AS7和AS19有什么区别?

    dahua1981(dahua1981) 发表:柱子也有酸碱性啊
    如果不匹配肯定是分离不好的

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  • arvid2007

    第7楼2012/05/28

    应该是说流动相有酸碱性吧,柱子有酸碱性,这个都没听说过

    yangmumayi(yangmumayi) 发表:柱子也有酸碱性是怎么个理解呢 戴安的AS7和AS19有什么区别?

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  • arvid2007

    第8楼2012/05/28

    原来是这样,那个次级保留是什么意思呢?[url=javascript:void(0);][/url]

    xue2009(xue2009) 发表:楼主说的在酸性流动相条件下不成峰型的原因是:目标物上的N原子结合质子带上正电荷,这样极性增大,因而在反相柱没有较好的保留效果,因而峰型变差;而在碱性流动相条件下具有较好的峰型原因是:碱性条件抑制了N原子结合质子的能力,因而目标物以分子形式存在,使得在分离过程中能够得到较好的峰型。但由于硅羟基的次级保留作用导致目标物的残留比较大,所以这些目标物适合在酸性条件下加阳离子对试剂分离。

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  • xue2009

    第9楼2012/05/28

    次级保留就是由于硅羟基的作用而导致的拖尾。

    arvid2007(arvid2007) 发表:原来是这样,那个次级保留是什么意思呢?[url=javascript:void(0);][/url]

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  • samanthalas

    第10楼2012/05/29

    大华说的"柱子也有酸碱性" 指的应该是每种柱子都有自己的PH耐受范围吧.

    yangmumayi(yangmumayi) 发表:柱子也有酸碱性是怎么个理解呢 戴安的AS7和AS19有什么区别?

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