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大家帮我看看这个鬼峰出现是什么原因吧

液相色谱(LC)

  • 我用乙腈和缓冲盐跑梯度跑的,这个鬼峰一直在12多分钟出现,我跑了空流动相,也是有这个峰,所以一直以为这鬼峰是缓冲盐梯度造成,在积分时,我都是选择这个保留时间不积分,以前都是这样做的,这个鬼峰吸收也就在40-50mAU左右,我的主峰都在2000-3000,以前都是这样做的。。
    可最近,在一次偶然实验中我流动相缓冲盐瓶子装成水了,所以在跑空流动相时,我发现也存在这个峰,这说明这个鬼峰不是缓冲盐造成的,我怀疑我用的水有问题,可我换了好几种水还是这样,有的水直接跑流动相这个峰的峰高竟达到700mAU,严重的是今天发现在跑样品时这个鬼峰竟然达到了500mAU(我的主峰只有1800左右),而且在跑空流动相时这个峰的峰高是80mAU左右。。
    现在实在不知道问题出在哪儿,是不是我这个色谱方法不好啊。。。这个鬼峰是怎么形成的。。怎么解决啊。。
    这个是今天空流动相的色谱图。。大家帮我看看吧,谢谢
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  • 朙朙

    第1楼2012/07/09

    刚刚我测另一个样品,这个峰峰高又降的130多了,怎么回事啊

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  • zhaohua8011

    第2楼2012/07/09

    梯度变化所致吧!再则流动相可能性也很大,建议新配置流动相试一试!

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  • fubo1980

    第3楼2012/07/09

    应助达人

    1、有可能流动相不好,总是有残留,可以考虑换根柱子看看。也有可能是比例阀污染所致。

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  • 150

    第4楼2012/07/09

    我有时也碰到 一起求解....

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  • 朙朙

    第5楼2012/07/10

    我的流动相都是两天新换一次的,一直是这样,就是最近这个鬼峰峰高忽上忽下的,把我搞迷糊了,不知道鬼峰产生的原因了

    zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:梯度变化所致吧!再则流动相可能性也很大,建议新配置流动相试一试!

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  • 朙朙

    第6楼2012/07/10

    流动相不好具体指什么啊,是不是要换流动相?另比例阀污染,怎么破

    fubo1980(fubo1980) 发表:1、有可能流动相不好,总是有残留,可以考虑换根柱子看看。也有可能是比例阀污染所致。

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  • gswsj

    第7楼2012/07/10

    缓冲盐可能污染,建议更换另一批号的缓冲盐试试。

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  • supreme

    第8楼2012/07/10

    应助达人

    从新更换下试剂看看呢,不行再换下柱子试试

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  • chy57589893

    第9楼2012/07/10

    这样的情况,造成这种情况的原因可能有两种:1.水里面有带入的杂质,因为你的整个过程都有水的参与,而且在水的比例比较小的时候响应会小些;2.可能是样品中带入的杂质,在色谱柱中形成了残留,你现在使用的流动相不能完全把它洗脱,形成了富集,因为在走空流动相时是80的 响应,而走样品时是500的响应,说明样品中确实有。
    我觉得后者的可能性较大些,你可以考虑换上一根色谱柱试试,看下情况,也坐下排除

    朙朙(xppcomeon) 发表:我用乙腈和缓冲盐跑梯度跑的,这个鬼峰一直在12多分钟出现,我跑了空流动相,也是有这个峰,所以一直以为这鬼峰是缓冲盐梯度造成,在积分时,我都是选择这个保留时间不积分,以前都是这样做的,这个鬼峰吸收也就在40-50mAU左右,我的主峰都在2000-3000,以前都是这样做的。。
    可最近,在一次偶然实验中我流动相缓冲盐瓶子装成水了,所以在跑空流动相时,我发现也存在这个峰,这说明这个鬼峰不是缓冲盐造成的,我怀疑我用的水有问题,可我换了好几种水还是这样,有的水直接跑流动相这个峰的峰高竟达到700mAU,严重的是今天发现在跑样品时这个鬼峰竟然达到了500mAU(我的主峰只有1800左右),而且在跑空流动相时这个峰的峰高是80mAU左右。。
    现在实在不知道问题出在哪儿,是不是我这个色谱方法不好啊。。。这个鬼峰是怎么形成的。。怎么解决啊。。
    这个是今天空流动相的色谱图。。大家帮我看看吧,谢谢

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  • 朙朙

    第10楼2012/07/10

    可是我用纯水代替盐跑流动相也是有这个峰啊

    gswsj(gswsj) 发表:缓冲盐可能污染,建议更换另一批号的缓冲盐试试。

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