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CE的重现性难道可以这么差??

  • rosemarinus
    2012/08/07
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • 最近在做CE的方法学验证,连续5针的精密度(其实走了7、8针),迁移时间没什么问题,可是峰面积就糟糕了,RSD基本上在10-25%左右晃荡,现在看来相差200--300,那叫正常啊!有时竟然相差了2000,我的妈呀,吓屎个人!!!大姐大哥们,赶紧帮忙出个辄,小妹在此拜谢啦

    我做的是标准品,应该没什么问题,因为我重新配制了很多次。缓冲是20mM的磷酸盐缓冲液,pH为9.0,每次也新配置哦,压力进样 0.5psi,4s,分离25kv
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  • nini2006

    第1楼2012/08/07

    你这个差得有点不正常。建议buffer用过了超过一个小时换新的,每针用的buffer也尽量用同一次配的,另外,每针之间最好能用0.1 M氢氧化钠冲1-3min。

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  • lighter168

    第2楼2012/08/08

    Buffer还有瓶盖要勤换,还有可以适当加长进样时间试下.

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  • rosemarinus

    第3楼2012/08/08

    你说的没错,我正是怕缓冲有问题,所以常换的,不过,倒是没用碱冲,因为我觉得碱冲过后,会打破管子里的平衡,是不是?

    nini2006(nini2006) 发表:你这个差得有点不正常。建议buffer用过了超过一个小时换新的,每针用的buffer也尽量用同一次配的,另外,每针之间最好能用0.1 M氢氧化钠冲1-3min。

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  • rosemarinus

    第4楼2012/08/08

    加长进样时间,峰型就不好看了,变得宽宽的,不对称

    lighter168(lighter168) 发表:Buffer还有瓶盖要勤换,还有可以适当加长进样时间试下.

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  • nini2006

    第5楼2012/08/09

    不排除有这样的可能,不过我每针之间冲3min都没发现有不良影响,你可以自己试试

    rosemarinus(rosemarinus) 发表:你说的没错,我正是怕缓冲有问题,所以常换的,不过,倒是没用碱冲,因为我觉得碱冲过后,会打破管子里的平衡,是不是?

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  • rosemarinus

    第6楼2012/08/10

    嗯 我试试看

    nini2006(nini2006) 发表:不排除有这样的可能,不过我每针之间冲3min都没发现有不良影响,你可以自己试试

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  • ericwong

    第7楼2012/08/10

    用的是什么缓冲液?

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  • ericwong

    第8楼2012/08/10

    CE的重现性是不好,不过不会这么差

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  • cpudaxiao

    第9楼2012/08/11

    各方面条件控制好的话,相关系数0.98应该没问题,要有经验的人看你操作一遍就知道问题在哪了。

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  • nini2006

    第10楼2012/08/11

    两个9还是很容易达到的,三个9需要费点功夫,只是4个9就只好去问问周公了。

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:各方面条件控制好的话,相关系数0.98应该没问题,要有经验的人看你操作一遍就知道问题在哪了。

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