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关于毛细管电泳电动进样重现性的问题

毛细管电泳(CE)

  • 采用电动进样的方式对样品进行大体积浓缩,样品峰面积得到了放大且可以完全分离,但是峰比较宽;更为发愁的是,重现性完全不行啊!主要表现在:
    (1)峰面积(或峰高)不稳定,有时候连续测定能相差1/3,偶尔出现连续2次进样比较稳定的情况,但是科研这玩意不能看运气啊是吧.....
    (2)出峰时间的偏差也稍微有些大。
    对比了压力进样的模式,得到的峰面积和迁移时间均良好重复,但是进样量受限于柱子的体积无法实现富集。至此,是否可以归结为我的样品(十二烷基苯磺酸钠,一种常用的阴离子表面活性剂)在电场作用下不稳定导致电动进样的重现性太差?有没有什么方法可以验证这一假设,或者其他改进方法以提高电动进样的重现性?
    ps:仪器型号为贝克曼MDQ,配紫外检测器。
    pps:单位就我一个人在用这个仪器,实验过程步履维艰。望各位不吝赐教,在下感激不尽!
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  • CEcret

    第1楼2017/10/20

    电压进样,本身其重现性不如压力进样.特别是在进样时间较长的时候. 此外,电压进样还存在广泛的进样歧视,因此通常只有在buffer或样品黏度较大,压力进样不容易实现的时候才选择电压进样。
    针对你所进行的富集实验,可以通过调节样品溶液的电导率来时间更高倍数的富集效果。你可以尝试一下。

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  • 小超子

    第2楼2017/10/20

    距离发帖已经过去一个多月,以为已经沉啦!感谢回复!
    确实是为了做富集才用的电动进样,样品是溶解在水中,富集效果还是比较明显。问题是,同样的缓冲液和样品重复几次峰面积差别较大,隔一天之后迁移时间会延长。现在怀疑是毛细管柱的性质不稳定,正在联系购买进口柱子以及涂层毛细管柱。
    不知道大侠有何建议?

    CEcret(v2812644) 发表:电压进样,本身其重现性不如压力进样.特别是在进样时间较长的时候. 此外,电压进样还存在广泛的进样歧视,因此通常只有在buffer或样品黏度较大,压力进样不容易实现的时候才选择电压进样。
    针对你所进行的富集实验,可以通过调节样品溶液的电导率来时间更高倍数的富集效果。你可以尝试一下。

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