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新毛细管柱你是如何处理的?

毛细管电泳(CE)

  • “新毛细管柱的处理”这个话题虽然是老生常谈但却一直饱受争议,牌子不同、各人的习惯不同,处理方法也不尽相同。而不同的处理方法对后续实验所产生的影响也从来还没有人真正去考察过。

    所以今天召集大家一起聊一聊新毛细管柱的前处理问题,希望大家畅所欲言~~~

    大家不要“拿完就走”,留个脚印吧,“分享和交流”本身就是一件令人快乐的事不是吗?
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  • nini2006

    第1楼2012/08/28

    值得讨论讨论,我先发言哈

    新毛细管柱前处理的其目是清洁和活化管内壁,据我所知的处理方法有:
    1、 甲醇15min,1M HCl 15min,1M NaOH 60min ,0.1M NaOH 120min, 在0.1 NaOH中过夜。(据说overnight是不好的,NaOH对管子有腐蚀作用,不建议太长时间冲洗)
    2、甲醇5-10 min,0.1M NaOH 15-30 min (1 M NaOH的话只需5 min),水5 min,缓冲液各5-10分钟。
    3、有些人搞“歧视”:如果是国内买的管子冲洗时间要比从国外买的长“狠”多。
    4、Beckman的中文说明书中(英文说明书木有提及新管处理方法)说新管要依次用甲醇,0.1 M HCl和1 M NaOH冲2 min(当然,中间每次换液前都有用水冲0.5 min)。(他们家出的是神管,我至今还没有机会用过,但是冲洗时间短得让我怀疑,无论如何,先膜拜一下)

    本人用的虽然也是国外的管子,但是1 M的NaOH我通常得冲上1-2 h才会稳定。盐酸我是不用的,甲醇也很少用,只有在怀疑管子比较脏自己心里那关过不去的时候才拿来冲一下。
    PS: 总体感觉单冲1 M的NaOH就够用了。大家见仁见智吧。且占座听听楼下的意见。

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  • ericwong

    第2楼2012/08/30

    我一般也是1 M的NaOH先冲洗,然后是水,最后是缓冲液

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  • ericwong

    第3楼2012/09/28

    大家都说说自己是如何处理毛细管的啊

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  • beyond1977

    第4楼2012/10/10

    应助达人

    我们现在是甲醇5,水2,0.1M盐酸5,水2,1M氢氧化钠10,水2。
    beckman工程师提供的方法,个人建议氢氧化钠用稀一点的好,柱子寿命会长点,还有我么现在一直用国产柱子,效果也很不错。价格比beckman便宜太多了。

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  • ericwong

    第5楼2012/10/11

    做过两种毛细管的比较吗?

    beyond1977(xsh6743) 发表:我们现在是甲醇5,水2,0.1M盐酸5,水2,1M氢氧化钠10,水2。
    beckman工程师提供的方法,个人建议氢氧化钠用稀一点的好,柱子寿命会长点,还有我么现在一直用国产柱子,效果也很不错。价格比beckman便宜太多了。

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  • beyond1977

    第6楼2012/10/11

    应助达人

    具体对比数据没有做过,但是目测就能看出图层和管子的均匀度,beckman的柱子都要比国产柱好,但我们使用下来却是差别不是很大,仅对我们这种生产性厂家,国产柱就能满足。其实不仅柱子,我们现在用的4台机子出了问题最多的是轴板上的光敏电阻,现在我们都是自己买电阻自己换,买个安捷伦的也才20-30块,找贝克曼换要好几千。不过有点还得说beckman真是好,很多维修方面的知识都会教我们,记得去年还参加过他们组织的维修培训

    ericwong(ericwong) 发表:做过两种毛细管的比较吗?

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  • ericwong

    第7楼2012/10/11

    目测看出图层和管子的均匀度?
    毛细管的均匀度应该是内径的均匀度,这个如何目测啊?

    beyond1977(xsh6743) 发表:具体对比数据没有做过,但是目测就能看出图层和管子的均匀度,beckman的柱子都要比国产柱好,但我们使用下来却是差别不是很大,仅对我们这种生产性厂家,国产柱就能满足。其实不仅柱子,我们现在用的4台机子出了问题最多的是轴板上的光敏电阻,现在我们都是自己买电阻自己换,买个安捷伦的也才20-30块,找贝克曼换要好几千。不过有点还得说beckman真是好,很多维修方面的知识都会教我们,记得去年还参加过他们组织的维修培训

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  • beyond1977

    第8楼2012/10/11

    应助达人

    毛细管内部当然不能目测,但外面可以看到啊,国产管子偶尔会有的地方起个小鼓之类的。

    ericwong(ericwong) 发表:目测看出图层和管子的均匀度?
    毛细管的均匀度应该是内径的均匀度,这个如何目测啊?

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  • fengling-cool

    第9楼2012/10/11

    我用的是beckman的毛细管,清洗方法是在他们相关的资料上找到的,为甲醇5min,0.1M NaOH 30min,水5min,缓冲液10min,可是这样洗完后,不上样15kv分离的基线十分的不稳,不知道大家有没什么建议呢?

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  • nini2006

    第10楼2012/10/11

    他们的资料上的这个冲洗程序默认的是用他们家的管子。但是其他厂家的管子就不敢保证是怎么冲洗比较好了。这个得使用者自己试试才行

    fengling-cool(fengling-cool) 发表:我用的是beckman的毛细管,清洗方法是在他们相关的资料上找到的,为甲醇5min,0.1M NaOH 30min,水5min,缓冲液10min,可是这样洗完后,不上样15kv分离的基线十分的不稳,不知道大家有没什么建议呢?

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