yzulcl
第2楼2012/09/08
APCI 我基本没怎么用,偶尔用一次,所以了解不多,就不乱说了。说说 ESI :
在目前通常的液质联用的 ESI 操作条件下,ESI 确实是浓度型检测器,对进入 ESI 的样品浓度敏感,对流速不敏感,所以柱后分流不会影响 ESI 的灵敏度。
但是,我在书上看到:在很低的流速下,ESI 就不再是浓度型的了,而是质量型的!也就是说只要流速足够低,那么 ESI 就是质量型检测器,对流速敏感。
yzulcl
第3楼2012/09/08
紫外检测器是浓度型的没错。
如果你不接色谱柱(用两通代替色谱柱),在恒定流速的条件下,在进样量足以忽略流动相的稀释效应的前提下,做改变进样量的实验,你会发现:增加进样量并不会增加紫外吸收信号的高度,只是增加信号的宽度。
一旦接上色谱柱,情况就不一样了。由于样品在色谱柱上的保留以及在固定相和流动相之间的分配,样品在随流动相离开色谱柱的时候,是以一个流出曲线按照时间顺序以不同的浓度离开的。具体情况请参阅色谱书籍。
在理论塔板数相同的条件下,相同浓度的样品增加进样量也好,相同的进样量增加浓度也好,结果都是增加了进入色谱柱的样品的绝对量。只要色谱柱没有超载,紫外检测器没有饱和,用紫外检测器记录的色谱峰的信号(峰高、峰面积)是随绝对的进样量增加而增加的。
这样看来,我们做标准曲线,似乎很简单,不再需要配置一系列不同浓度的标样了,只要一个浓度的标样,改变进样量就可以做出标准曲线。确实是这样,只要你保证进样体积足够准确。我也做过这样的实验,确实能做出标准曲线。那大家为什么还是很费事的配置一系列不同浓度的标样,然后用相同的进样量来做标准曲线呢?这个问题,只要是色谱用得久的,都知道为什么。这里说出来只是给你一个提醒,具体原因,或许你已经知道,暂且不论。
剑
第10楼2012/10/31
二者都不是检测器,是离子化设备吧,通过离子化效率来影响信号强弱
我觉得,质谱仪被称作检测器,是针对于色质联用这个体系来说的,就质谱本身,电子倍增管/模数转换器/电极对才是检测器。
而质谱中的检测其本身却是质量型的,因为信号可以随着时间累积,越多的粒子到达检测器,信号越强;但是UV,信号不能随着时间累计,一束光过去,读出一个值,该指取决于光通过的瞬间待测物质的浓度。如果改变UV的工作的方式,让UV每次测量的信号累计起来,多次测量后给出一个吸光度值,那UV也变成质量型的了。
所以质谱作为一个总体,应该也是质量型的检测器。它检测了在一定时间,比如50毫秒,到达质谱检测器的粒子数量多少。在色质联用的仪器中,样品浓度越高,信号越强,是因为在恒定时间到达检测器的粒子多了。如果离子化效率不变,100uM,50ul/min的信号应该是100uM, 100ul/min的信号的一半,因为同样时间只有一半的粒子到达检测器。用针泵进样一试便知。