前言
人工合成着色剂又称人工合成色素，常以苯、甲苯等为原料，先制备色素中间体，再将一种或两种中间体进行磺化、偶合、缩合和偶氮化等化学反应而制成。《食品中合成着色剂的测定》（GB/T 5009.35-2003），采用聚酰胺吸附食品中的人工合成着色剂，并用乙醇胺溶液进行洗脱。聚酰胺对合成色素的吸附能力会受到温度的影响，实验时需对样品和淋洗液做加热处理，而且乙醇胺浓缩所需时间过长，此方法不适合大批量样品同时处理，且不易做自动化方法移植。
大多数人工合成着色剂均具有苯磺酸钠结构，本实验选用天津博纳艾杰尔科技的Cleanert PWAX 弱阴离子型固相萃取小柱，用以吸附红酒中的合成着色剂，选用氨化甲醇洗脱，浓缩时间短，适用于大批量样品的同时检测。
样品信息
实验方法
实验试剂和材料
乙酸，分析纯；
甲醇，色谱纯；
水，超纯水；
乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取1.54g乙酸铵，加水溶解并稀释至1000mL；
甲醇/甲酸（6+4）溶液：量取甲醇60 mL，甲酸40 mL，混匀；
柠檬酸溶液：称取20g柠檬酸，加水至100 mL溶解，混匀；
氨化甲醇：准确量取2ml氨水溶液于100ml容量瓶，用甲醇稀释并定容至刻度，混匀；
水（PH=6.0）：水加柠檬酸溶液调节PH=6.0；
水（PH=4.0）：水加柠檬酸溶液调节PH=4.0；
合成着色剂储备液：每1.0 mL中含柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝各0.5mg；
合成着色剂混合标准溶液：上述合成着色剂储备液逐级稀释成每1.0 mL中含柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝各5μg的水溶液；
固相萃取小柱：Cleanert PWAX（60mg/3ml）；
液相色谱柱：Venusil XBP C18（5μm，100Å，4.6*150mm）；
针式过滤器：Clarinert H-y-d-r-o-p-h-i-l-i-c PTFE（0.45μm，13mm）。
试样处理
准确量取某品牌红酒5ml，加入合成着色剂混标溶液1.0mL，混匀，用10%氨水调节PH约6.0，将全部试样经过Cleanert PWAX柱（3ml甲醇和3mlPH=6.0水活化），流速控制在1ml/min左右，分别用水（PH=4.0）、甲醇/甲酸（6+4）溶液和水各3ml淋洗，最后用氨化甲醇3 mL洗脱，收集洗脱液于50℃氮气吹干，加水定容至1.0mL，经0.45μm滤膜过滤，待测。
液相色谱条件
色谱柱：Venusil XBP C18，5μm；4.6*150mm；流速：1.0 mL /min；
进样量：20μL；波长：254nm；柱温：30℃；
梯度：
四．实验结果
表1 1μg/ml添加回收实验结果—回收率
五、实验结论
Cleanert PWAX固相萃取小柱为弱阴离子型离子交换小柱，可用于吸附净化样品中的强酸性化合物。通过实验结果表明，其可以用于红酒中的合成着色剂的净化。相对于传统方法，此方法在大批量样品检测中有很大的时间优势，且便于做自动化仪器的方法移植。
附录：
图1 混标溶液色谱图
图2 混标过柱色谱图
图3 红酒空白色谱图
图4 1μg/ml添加回收实验色谱图
针对有版友对15min左右的目标峰空白杂质干扰问题，重新整理了一下实验谱图，下面是空白（蓝线）、加标（红线）和标样（绿线）的谱图叠加：
从叠加谱图中可以看出空白中的杂质峰可以与目标峰完全分离，如果以前的说话给大家带来困扰，实在抱歉啊
实验还是应该踏踏实实的做，数据应该仔仔细细的整啊。
弱弱的问一句，这个论坛可以抢家具不？
版主晚上也值班吗 辛苦了啊
我的沙发没了，这可是俺的第一次。。。。。。。。。。。。。。原创帖啊 
这个速度必须快！放弃WOW来跟版友交流，多欢乐呢，哈哈~这里允许抢家具，但是LZ看站短……
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研！
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
报名开启：ICS2024第十三届光谱网络会议！
推荐收藏！盘点中药材及饮片检测解决方案
