仪器分析实验指导(内部使用）

七、72型分光光度计的操作规程
1、IS—722型光栅分光光度计的操作规程
a、打开仪器的防尘罩，折好置于仪器的旁边（不可置于仪器上，特别是仪器散热的部位），检查仪器是否有异样。
b、打开仪器前面板的电源开关，使指示灯亮起，打开样品室盖，预热25分钟后方可进行使用。
c、按Frange三键中的[T]键，调节波长选择旋钮，使波长窗显示为所需的波长（单位：nm）。
d、在样品室盖打开时调节透射比调零旋钮[0%T ADJ]，使数据显示窗的读书为0。
e、把参比溶液和样品溶液放入比色皿座（注意：定位杆不能挡住光路），合上样品室盖，拉（推）转换样品池拉杆[Cell Changeover]，将参比溶液移入光路,调节亮度粗调旋钮和细调旋钮[Coarse and Fine Brightness ADJ],使T的读数为100%,直至打开样品室盖读数为0、合上时为100%时方可进行测量。
f、若是测定吸光度A，先完成以上a～e步骤。再将测量方式按键Range中的[ABS]键按下。仪器即为吸光度A的测量方式。此时A的读数应为0.000（若不为0时可调节[ABS0Fine]旋钮将读数调为0。(注：此时应有参比溶液置于光路中），然后将样品移入光路，稍稳定可读数。
注：若样品吸收过大，不足10%（即A值超过2）数据溢出数显表的显示范围，可通过提高参比溶液的A值或稀释样品溶液后再进行测试。
2、IS—7220型可见分光光度计的操作规程
（1）、透射比测量
a、打开仪器电源（电源开关在仪器的右侧）预热15分钟；
b、打开样品室盖，放置参比溶液及样品溶液（有规律的放置便于记住）；
c、调节波长旋钮，使波长显示窗所需波长值；
d、按下方式选择键[MODE]使透射比[%T]指示灯亮，拉动样品池拉手，使参比溶液置于光路；
e、按[100%TO]键调100%，推动样品池拉手使样品挡住光路。此时显示器应显示为0，若不为0，则按住[0%]键几秒种，使其显示为0；
f、拉出样品池拉手，使参比溶液置于光路，其显示器的读数应为100.0，若不为100.0，需按[100%T]键调100%；
g、拉动样品池拉手使被测量样品依次进入光路，依次待读数稳定可记下读数。
（2）、吸光度测量
当测量完透射比值时，直接按[MODE]键，使吸光度[ABS]指示灯亮，此时数据显示窗所显示的即为吸光度值。
注：仪器使用完以后要登记

实验二 水溶液pH值的测定

(一)Ag,AgCl│HCl(0.1mol/L)│玻璃膜│试液║KCl（饱和）│HgCl2,Hg(+)

▕←—————玻璃电极—————→▏ ∣←—饱和甘汞电极—→∣

缓冲溶液的pH值与温度关系的对照表：

实验三 电位滴定法测定醋酸的含量

实验四 吸光光度法测定水和废水中的总磷

（缩合磷酸盐或有机磷中的磷）+2O₂→PO₄^3-

PO₄^3-+12MoO₄^2-+24H⁺+3NH₄⁺→（NH₄）PO₄•12MoO₃+12H₂O

实验五 紫外—可见分子吸收光谱法的应用
——苯的紫外光谱的测定与分析


一、实验目的
1、掌握利用紫外分子吸收光谱进行定性和定量分析；
2、掌握756型单光束紫外—可见（UV—VIS）分光光度计的使用。

二、实验原理
许多有机化合物在一定能量的电磁辐射下伴随着价电子能级的跃迁。根据量子理论：基态电子发生跃迁所吸收的能量是既定的，即满足E-E=hυ时才能产生跃迁。产生各种跃迁所需的能量为：ΔE电子≈1～20eV；ΔE震动≈ΔE电子×（1/10～1/100）≈0.01～2eV；ΔE转动≈ΔE震动×（1/10～1/100）≈1×10-4～0.02eV[1],紫外可见光波长范围为:λ可见=800nm～200nm(常用的波长分析范围。200nm～10nm为真空紫外区，主要是CO2、O2等对这波长范围的谱线有严重的吸收，导致干扰分析测定，所以要求在真空中进行测定)。相对的能量为6.2eV～1.6eV，其能量可以满足部分电子能级跃迁的需要。此外，在电子能级跃迁也伴随着相应的振动和转动能级的变化（ΔE电子>ΔE震动>ΔE转动），若是仪器的分辨能力不高，则使三种谱线（或精密结构）密集在一起，则使打印出来的图谱的峰宽变宽（在仪器分辨能力一定时，溶剂由极性到非极性也可使这些精密结构消失[2]）。
利用分子中生色基团对特定谱线的吸收可进行定性分析，利用浓度与吸收值成正比（即朗伯—比尔定律）可进行定量分析。
进行定性分析时，一般用的是比较法，把待分析的未知化合物的谱图与纯的已知物的谱图或标准谱图（如萨勒特光谱图等）进行比较；也可以用有机化合物吸收波长的经验规则的计算值进行分析[3]。但应该注意的是：相同的紫外吸收光谱不能充分地证明两种化合物是完全相同。因为只要有相同的发色基团，而分子结构可以不同，它们的最大吸收波长λmax为相同。所以紫外—可见光谱图在分析未知化合物时只是提供有可能的基团结构信息，常和NMR、MS和IR（即四谱）联用，使得分析更为准确、可靠。
苯有三个吸收带，分别为：E1带(180nm，εmax=6×104L•cm-1•mol-1)、E2带（204nm，εmax=8×10L•cm-1•mol-1）和B带（255nm，εmax=200L•cm-1•mol-1），都是→的跃迁。在分析的时候可以大致的进行判定。

三、仪器与试剂
1、仪器 756型单光束紫外可见分光光度计（附1cm的石英比色皿）
2、试剂 苯（A.R.）
环己烷(A.R.)

四、实验步骤
1、准备
a、通电之前检查样品室，样品室除比色皿架外，不应有其他物体。
b、打开电源（开关位于仪器右侧下方），仪器自动进入初始化。约等10min，初始化完毕，波长显示：220（nm）并打印出“UV—VIS Spectropho Tometer Model 756MC”,这时方可进行测量操作。
2、未知物的光谱图扫描
a、参数的设定（“→”表示键入；若是键入错误要清除，按键[CE]）
→[MODE]→[1]（选择波长扫描方式）→[ENTER]→[ ]（选择扫描步长）→[ENTER]→[/A]→[1]（选择T方式）→[ENTER]→[λ RANGE]（设置横坐标（扫描波长）范围）→[190]（起始波长为190nm）→[ENTER]→[300]（终止波长为300nm）→[ENTER]→[T/A RANGE]（设置纵坐标（T/A）范围）→[ENTER]→[ENTER]→[FUNC]（进行功能设置）→[81]（存储功能；0不存储，1为存储）→[0]→[ENTER]→[FUNC]→[83]（扫描速度1～4）→[ENTER]→[3]→[ENTER]→（把样品移入光路）→[START/STOP]。仪器进入波谱扫描，并打印出相应的谱图。
b、分析谱图
选择合适的波长为下步骤测定浓度用，其波长为： （nm）。
3、浓度的测量
a、苯标准样品：取四个10mL的容量瓶，用吸量管分别取0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL的苯（A.R.），用环己烷（A.R.）定容至刻度。
b、仪器的操作过程（“→”表示键入；若是键入错误要清除，按键[CE]）
→[MODE]→[2]→[ENTER]→[T/A]→[3]→[ENTER]→[2]→[ENTER]→[4]（作工作曲线所用标样数）→[ENTER]→[0]（第一个标样的浓度为0）→[ENTER]→[ ]（第二个标样的浓度）→[ENTER]→[ ]（第三个标样的浓度）→[ENTER]→[ ]（第四个标样的浓度）→[ENTER]→[GOTO λ]（设置进行分析的波长）→[ ]（上面所选的波长）→[ENTER]→[ABS0/T%100]（调零或调百，此时应用参比溶液位于光路中）→（将第一个标样移入光路、稳定）→[START/STOP]→[ABS0/T%100]（调零或调百，此时应用参比溶液位于光路中）→（将第二个标样移入光路、稳定）→[START/STOP]→[ABS0/T%100]（调零或调百，此时应用参比溶液位于光路中）→（将第三个标样移入光路、稳定）→[START/STOP]→[ABS0/T%100]（调零或调百，此时应用参比溶液位于光路中）→（将第四个标样移入光路、稳定）→[START/STOP]（待打印完毕）→[0]（存储数据功能；0否，1是）→（将待测样品一移入光路、稳定）→[START/STOP]→（将待测样品二移入光路、稳定）→[START/STOP]。
c、从打印机上取下谱图、数据供分析用。
d、仪器的模式退出到T方式，清洗干净石英比色皿放回原处。关闭电源，整理实验室。

五、数据处理
根据所打印的数据和谱图进行分析，并计算出被测试样苯的浓度，以mol/L表示（苯的分子量为78.11；比重为0.88）。

六、思考题
1、用紫外—可见分光光度法测得某两种物质的最大吸收峰值在同一波长处，可否判断是同一物质？为什么？
2、用紫外—可见分光光度法进行物质分析应注意什么？
3、在分析谱图时要不要注明所用的溶剂？为什么？
4、对苯的扫描谱图进行分析，指出E2和B带。






















参考文献
有机化合物结构分析与鉴定，冯金城，国防工业出版社，2003
现代有机分析，余仲建、李松兰、张殿坤，天津科学技术出版社，1994
仪器分析，武汉大学化学系，高等教育出版社，2001
谱学方法在有机化学中的应用，谈天，高等教育出版社，1985
基础仪器分析实验，北京师范大学化学系分析研究室，北京师范大学出版社，1985
仪器分析实验，《仪器分析实验》编写组，复旦大学出版社，1988

这个帖子好，楼主可以一个实验内容一个帖子，这样看起来也比较方便，最后可以在版面置顶帖子里面放个目录的链接，大家想看哪一个内容就很容易找到的。

想我大学毕业的时候带回来很多书，但是用的最多专业书就是那些老师自己编的或者买的实验指导书。

感谢LZ分享~~~

和钼蓝法测磷挺像