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盐酸左氧氟沙星 有关物质 杂质A 分不开

  • zhuyongboxlf
    2012/12/31
  • 私聊

化学药检测

  • 如题,俺第一次测盐酸左氧氟沙星,做有关物质时杂质A与左氧保留时间完全重叠,排除了乙酸铵、高氯酸钠等试剂滴原因,实在没辙咧,请教大虾帮忙。

    盐酸左氧氟沙星有关物质测定方法(来源:中国药典2010年版第一增补本):

    有关物质 取本品,精密称定,加0.lmol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含1.2mg的溶液,作为供试品溶液,精密量取适量,用0.1mol/L盐酸溶液定量稀释制成每1ml中含2.4ug的溶液,作为对照溶液。另精密称取杂质A对照品约18mg,置100ml量瓶中,加6mol/L氨溶液1ml与水适量使溶解,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,作为杂质A对照品溶液。照高效液相色谱法(附录V D)测定,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以醋酸铵高氯酸钠溶液(取醋酸铵4.0g和高氯酸钠7.0g,加水1300ml使溶解,用磷酸调节pH值至2.2)-乙腈(85 :15)为流动相A,乙腈为流动相B;按下表进行线性梯度洗脱。柱温为40°C;流速为每分钟1ml。称取左氧氟沙星对照品、环丙沙星对照品和杂质E对照品各适量,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含左氧氟沙星1.2mg、环丙沙星和杂质E各6ug的混合溶液,取10ul注人液相色谱仪,以294nm为检测波长,记录色谱图,左氧氟沙星峰的保留时间约为15分钟。左氧氟沙星峰与杂质E峰和左氧氟沙星峰与环丙沙星峰的分离度应分别大于2.0与2.5。量取对照溶液10ul注人液相色谱仪,以294mn为检测波长,调节检测灵敏度,使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%。精密量取供试品溶液、对照溶液和杂质A对照品溶液各10ul,分别注人液相色谱仪,以294nm和238nm为检测波长,记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰,杂质A(238nm检测)按外标法以峰面积计算,不得过0.3%。其他单个杂质(294nm检测)峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.2%),其他各杂质(294nm检测)峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(0.5%)。供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.1倍的峰可忽略不计。

    时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%)
    0 100 0
    18 100 0
    25 70 30
    39 70 30
    40 100 0
    50 100 0
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  • tangtang

    第1楼2012/12/31

    只能换色谱柱试试了。

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  • xiangever

    第2楼2013/01/01

    这个好像是药典写错了。。。。。因为主峰过载, 你肯定分不开,我咨询过制定标准的专家,他说他当初制定的不是这个浓度。。。。你用含量的系统做吧。。。。另外,你没发现标准中杂质A的对照品溶液浓度错了?标准中多稀释了10倍,你可以参考下药典的左氧氟沙星标准

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  • xiangever

    第3楼2013/01/01

    不管你采用什么C18色谱柱都不可能分开的,因为标准写错了。。。。我咨询过制定该标准的专家(好像是浙江的),他说药典标准和他提交的系统液的浓度不一致。。。。你只有用含量的系统液才能分开。。。。换个角度,有关物质系统液中左氧氟沙星的峰都过载了,想达到分离度要求很难。。。

    另外,你没发现标准中的杂质A对照品溶液的浓度是杂质A限度值的1/10,你没觉得奇怪么?看看左氧氟沙星的标准你就知道了。

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  • xiaowang268

    第4楼2013/01/08

    药典标准错了?

    xiangever(xiangever) 发表:不管你采用什么C18色谱柱都不可能分开的,因为标准写错了。。。。我咨询过制定该标准的专家(好像是浙江的),他说药典标准和他提交的系统液的浓度不一致。。。。你只有用含量的系统液才能分开。。。。换个角度,有关物质系统液中左氧氟沙星的峰都过载了,想达到分离度要求很难。。。

    另外,你没发现标准中的杂质A对照品溶液的浓度是杂质A限度值的1/10,你没觉得奇怪么?看看左氧氟沙星的标准你就知道了。

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  • 瞌睡虫

    第5楼2013/01/08

    药典写错了,为什么不修改?

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  • xiaowang268

    第6楼2013/01/09

    药典不会错把

    瞌睡虫(v2671379) 发表:药典写错了,为什么不修改?

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  • xiangever

    第7楼2013/01/09

    你们对比一下药典中盐酸左氧氟沙星和左氧氟沙星的标准就知道了......另外,那个系统适用性实验我是死活做不出来,安捷伦、waters、汉邦、菲罗门的都不能符合要求,所以很悲催.....我们是实验科学嘛,试试看

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  • tangtang

    第8楼2013/01/09

    可联系色谱柱厂家做样品试试。

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  • xiaowang268

    第9楼2013/01/18

    换柱子也不行

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  • xiaowang268

    第10楼2013/01/18

    用3微米的柱子试试吧

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