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免疫亲和柱使用注意事项

液相色谱(LC)

  • 亲和柱操作注意说明:

    柱子保存温度在4度冰箱,注意不要冷冻。

    使用前至少提前半小时取出放于室温下,使柱子尽量恢复到室温。

    上柱子的样品溶液,一定要严格控制甲醇/乙腈的含量不能高于10%(低一些倒无妨)。

    如果说明书要求用水相。请尽量用水相。

    上样前,让柱子里面的保护液完全流净。

    上样后,要将上方泵流操作架上的塞子塞上。

    样品过柱时,不要加压,加压会流速过快,降低吸附的毒素量。

    即便是仅仅依靠重力过柱,流速也常常超过要求。所以,要将塞子塞上,尽量使样品过柱的流速放缓,让样品中的毒素有足够的时间和亲和柱里面的抗体充分接触并结合在一起。

    清洗步骤,要加压,加快流速。因为大部分清洗液是10%甲醇。太慢会洗掉一些已经吸附的毒素。5ml-10ml。比较干净是样品采用5ml即可。复杂些的样品可以10ml或者更多。

    洗脱时,一定要使用纯甲醇或者纯乙腈。充分温育至少2分钟。洗脱不可加压,速度也一定要放缓。塞上泵流操作架的塞子,可以降低流速。

    不要重力洗脱。因为重力洗脱的速度也超过要求。

    以上资料仅供参考,不同品牌可能有不同的处理方式。

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  • 有水有渝

    第1楼2013/01/18

    应助达人

    零回贴处理

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