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蛋白粉中蛋白质测定

  • yiyuxiner
    2013/07/30
    x射线仪器
    • 私聊

食品常规理化分析

  • 蛋白质是蛋白粉质量的一个重要的检测指标，目前蛋白质检测化学方法主要有凯氏定氮法、杜马斯燃烧法、双缩脲法、福林(Folin)——酚试剂法等。其中在食品领域以凯氏定氮法最为常用，本文主要是使用凯氏定氮仪测定样品含量。

    1 实验部分

    1.1仪器和试剂

    K1100F凯氏定氮仪；SH420石墨消解仪；万分之一电子天平；

    浓硫酸（98%）；催化剂片（硫酸铜和硫酸钾）；40%氢氧化钠；2%硼酸；0.0500mol/l硫酸标准滴定溶液；甲基红-溴甲酚绿混合指示剂；

    1.2方法

    1.2.1称样：三个样品，分别称取浓缩蛋白粉0.3000g，分离蛋白粉0.2000g，乳品蛋白粉0.2000g（区别在于三者工艺不同），连同无灰滤纸一起放于消化管中。每个消化管中再分别加入1片催化剂片，8ml浓硫酸。同时做空白。



    1.2.2消解 ：将样品放于消解仪上，盖好排废罩，打开冷凝水。蛋白粉样品消解过程不易上冲，所以采用直线升温，直接设定消解温度420，消解时间90min。



    1.2.3 蒸馏 滴定：消解冷却好的样品，放于定氮仪，设置好相应参数，直接测试，仪器自动蒸馏滴定，打印计算结果。

    2 数据与分析

    乳品蛋白

    编号

    质量

    蛋白质（%）

    RSD(%)

    1

    0.1933

    88.5139

    0.24

    2

    0.1944

    88.4623

    3

    0.1989

    88.2640

    4

    0.1916

    88.0859

    5

    0.1955

    88.1442

    6

    0.1928

    87.9907

    分离蛋白

    7

    0.1967

    84.5636

    0.22

    8

    0.1962

    84.0422

    9

    0.1969

    84.3040

    10

    0.1945

    84.3363

    11

    0.1926

    84.4842

    12

    0.1950

    84.4784

    浓缩蛋白

    13

    0.3000

    60.7893

    0.34

    14

    0.3016

    60.9002

    15

    0.3002

    60.8921

    16

    0.3056

    60.3924

    17

    0.3020

    60.5860

    18

    0.2988

    60.8959



    乳品蛋白、分离蛋白、浓缩蛋白的RSD（%）依次为0.24、0.22,、0.34，重复性较好。

    3 结 论

    鉴于上述结果，用凯氏定氮仪测定蛋白粉比较简便，重复性也好。

    题外话：

    关于回收率偶承认偶比较懒没做，之前测过了，仪器也是定期校正的。偶觉得从实际出发，我们不可能测个样品就非得做个回收率。后者是严谨的治学态度，但面对大量样品时，可行性有待考证吧。

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  • zhw19811005

    第1楼2013/07/30

    回收率是不是每个样品都要做呢，确实是一个值得探讨的问题

0
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  • qq250083771

    第2楼2013/07/30

    应助达人

    呵呵 凯氏定氮 比较常见啊

0
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  • 冰火女孩

    第3楼2013/07/30

    这个自动滴定仪很方便，比传统的方法简单多了。

0
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  • yiyuxiner

    第5楼2013/07/30

    请问指的那种滴定仪？测定原理是？学习下，请不吝赐教

    冰火女孩(xuwanxiu2006) 发表:这个自动滴定仪很方便，比传统的方法简单多了。

0
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  • 望舒

    第6楼2013/07/30

    我们也有类似一台凯氏定氮仪，不过没有你们的先进，我们的很不好用。

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  • 快乐

    第7楼2013/07/31

    应助达人

    取样量很少的情况下，这么高的含量，RSD很小，你的仪器不错。

0
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  • yiyuxiner

    第8楼2013/07/31

    这个样品含量比较高，这样基本控制在滴定体积十几毫升，是个最佳范围…………

0
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  • 快乐

    第9楼2013/07/31

    应助达人

    请问你的催化剂是自己配制的，这个比例是多少？一般情况下，自配的，主要存在消解时间长，消解不彻底，但从你的数据来看，是非常好的。

0
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  • yiyuxiner

    第10楼2013/07/31

    还与催化剂和浓硫酸体积有关，其实凯氏定氮在一定范围内也没那么严格，之前不用催化剂片时候，我都是加硫酸钾3.0g,硫酸铜0.2g,浓硫酸8-10ml,也消解的很好，就是怕那些易起泡的样品，消解起来费时费力

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  • nphfm2009

    第11楼2013/07/31

    应助达人

    我们用的也是全自动的定氮仪了

0
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