中性氧化铝方法-SPE-HPLC联用测定小麦中5种氨基甲酸酯类农药残留

温文尔雅

2013/09/16
药物分析

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前处理综合讨论

中性氧化铝方法-SPE-HPLC联用测定小麦中5种氨基甲酸酯类农药残留

摘要：

N- 甲基氨基甲酸酯( 以下简称氨基甲酸酯) 为农业上的一类常用农药, 由于氨基甲酸酯的不稳定性, 易高温分解, 故高效液相色谱(HPLC) 成为检测氨基甲酸酯的主要和常用的方法。国外的报道绝大多数都是采用HPLC-柱后衍生荧光检测 , 而采用紫外检测(UV) 的报道较少。而且SPE净化的方法很多，主要有氨基柱、中性氧化铝柱和C18柱等，本文使用Horizon公司生产的自动固相萃取仪，用中性氧化铝柱净化处理。

总结：

SPE-HPLC联用使小麦中氨基甲酸酯检测简洁化，操作简便，并且有较理想的结果。

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第1楼2013/09/16

1、实验部分

1.1 仪器与试剂

仪器：四元低压LabTech-HPLC；色谱柱：LabTech C18 4.6 mm×25 cm； LabTech旋转蒸发仪；Horizon-Smart Prep Extractor自动固相萃取仪；Multivap-8平行浓缩仪。

试剂：正己烷，重蒸；丙酮，重蒸；甲醇，色谱纯；乙腈，色谱纯；无水硫酸钠，分析纯；所用水均为超纯水。丙酮:正己烷（1＋1，体积比）：量取50 mL 丙酮和50 mL正己烷，混匀。

氨基甲酸酯标准溶液配制: 将5 种氨基甲酸酯分别以甲醇配成一定浓度的储备液, 冰箱保存。使用前取标准储备液一定量, 用甲醇稀释配成混合标准应用液。氨基甲酸酯混标（20 μg/mL）：涕灭威、速灭威、克百威、甲萘威（2 μg/mL）、异丙威。

中性氧化铝柱：500 mg，6 mL。

1.2 样品处理

1.2.1 样品制备

在超市购买的小麦样品。

1.2.2 样品提取

称取试样5 g（精确到0.01 g）于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈，均质提取1 min，于4000 r/min离心3 min。将上清液倾入50 mL离心管中，残渣再用10 mL乙腈重复提取1次，合并上清液于50 mL离心管中，加入10 mL正己烷，旋涡混匀，弃去正己烷。将乙腈层转入250 mL浓缩瓶中，于40℃水浴中浓缩至近干，加2 mL洗脱液溶解。

1.2.3 样品SPE净化

用2. 5 mL正己烷洗涤上述残留物3 次，并转入中性氧化铝SPE柱中, 再以2 mL正己烷洗涤SPE柱，弃去全部流出液。加入10 mL 丙酮：正己烷( 1+1, V / V )洗脱，收集洗脱液，40 ℃以下吹氮浓缩至近干，用甲醇定容至1. 0 mL，进HPLC分析。

1.3 HPLC色谱条件

流动相：甲醇:水(1:1)；流速：1.0 mL/min；紫外检测波长为210 nm；进样量：20 μL；柱温：40℃。

2 、结果与讨论

2.1 氨基甲酸酯的HPLC色谱图

将5种氨基甲酸酯混标进HPLC分析，浓度分别是涕灭威(5.0 mg/mL)、速灭威(5.0 mg/ mL)、克百威(5.0 mg/ mL)、甲萘威（0.5 mg/ mL）、异丙威(5.0 mg/ mL)，结果如图所示：见图1。

图1 5种氨基甲酸酯的HPLC色谱图

2.2 小麦样品的空白色谱图和加标色谱图

小麦空白样品和加标样品经过提取，并通过中性氧化铝柱净化后，得到的色谱图见图2和图3.。

图2 小麦样品空白色谱图

图3 小麦样品加标的色谱图（2 mg/kg）

2.2 小麦样品过中性氧化铝柱SPE净化的回收率及RSD

采用加标样品（加标浓度分别是涕灭威(2.0 mg/mL)、速灭威(2.0 mg/ mL)、克百威(2.0 mg/ mL)、甲萘威（0.2 mg/ mL）、异丙威(2.0 mg/ mL)），经提取、SPE净化处理，并用 HPLC 分析，计算加标回收率及相对标准偏差，5 种氨基甲酸酯的回收率均在 64.7%~100.2%之间，RSD 均小于 10%（表 1）。

小柱	峰序	保留时间（min）	SPE-1	SPE-2	SPE-3	平均值	RSD（%）
中性氧化铝固相萃取小柱	涕灭威	8.265	84.8	94.8	83.6	87.7	7.01
	速灭威	9.803	78.0	79.0	89.3	82.1	7.62
	克百威	11.968	85.3	84.3	96.4	88.7	7.57
	甲萘威	14.848	99.0	100.3	101.2	100.2	1.10
	异丙威	21.990	62.0	64.2	68.0	64.7	4.69

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第2楼2013/09/16

3、结论

本方法对小麦样品提取，并采用SPE净化，并采用HPLC检测其中的5种氨基甲酸酯残留，5种氨基甲酸酯的回收率均在64.7%~100.2%之间，RSD均小于10%。实验过程操作简单，结果显示数据理想，可用于常规的粮谷类中氨基甲酸酯农药残留的检测。

参考文献

〔1〕5009.163-2003动物性食品氨基甲酸酯类多组分农药残留测定-高效液相法测定.

〔2〕李萍和王绪卿. 肉及蛋类食品中氨基甲酸酯类农药多组分残留高效液相色谱分析.卫生研究, 2002,31( 6) : 465 - 467.

〔4〕顾亮，丁磊.液相色谱串联质谱法测定茶叶中氨基甲酸酯类物质研究.食品科学,2012(15):286-288.