仪器信息网APP

选仪器、听讲座、看资讯

立即体验

当前位置：仪器社区 >特色服务 > 厂商论坛 > 帖子详情

【许愿原创】有关物质检测方法之痛苦抉择【dahua1981推荐】

逆天一棍

2013/10/01
光谱

近来拿到一个分析方法，用来检测某制剂中主药的有关物质的含量。色谱柱是C18的色谱柱，流动相体系是缓冲盐和乙腈的混合梯度。

关于检验有关物质，我一般首先考虑等度洗脱，详见主题：对于有关物质检测方法开发的一些理解http://bbs.instrument.com.cn/topic.asp?threadid=4993353

在拿到这个方法，看到是梯度的条件，就想着用等度的方法改进。

选用博纳艾杰尔的Venusil XBP C18（L）色谱柱，4.6*150mm，5μm；Cat. ：VX951505-L；S/N：V9520515BM0106，柱温30℃，检测波长为240nm，进样量10μL，流速为1ml/min。

先用原方法走一遍，确定目标峰的出峰情况和个数：其中21min为主药的保留时间，后面28min的为一个辅料的色谱峰。

因为前面的思路，换成等度进行洗脱：

问题出来了，28min色谱峰居然在洗脱了110min后还是没有出来！

再换了梯度，色谱图是这样的：

上一针的辅料峰出来了，与这一针辅料峰的保留时间相比，居然才相差了2min！也就是说，用等度的方法，走了100多分钟，辅料料几乎在色谱柱上没有移动，完全保留在填料上了。只是再走梯度的时候，才进行了有效的洗脱！

也考虑调整等度时缓冲盐和有机相的比例，使各有关物质峰有效分离的前提下，辅料峰尽早洗脱。但是辅料峰洗脱了，前面的分离度达不到要求了；分离度合适了，辅料峰又无法洗脱了！

也想过在前处理的时候除去辅料峰，但是换了几种前处理方法，虽然可以把辅料峰有效缩小，但是没有办法完全消除，而且还容易带进来别的杂质峰。

实在不得已，只能又走回到原来梯度洗脱的老路上！真是痛苦啊！

精
该帖子已被管理者-设置为精华，下面是奖励记录：

相关话题

zhw19811005

第1楼2013/10/01

又回到了原来的方法。应该还是有途径解决的

0

逆天一棍

第2楼2013/10/02

也不是单纯的回到了老方法，还是有一点的改进的。最主要的是，摸清了样品和色谱条件之间的关系了。还是有收获的。
zhw19811005(zhw19811005) 发表:又回到了原来的方法。应该还是有途径解决的

0

吕梁山

第3楼2013/10/08

梯度洗脱是没有办法的办法啊

0

冰火女孩

第4楼2013/10/09

这峰型怎么这么好，我们刚换的柱子峰型也没有这么好过。

0

dahua1981

第5楼2013/10/09

应助达人

梯度洗脱还是省时间的

0

吕梁山

第6楼2013/10/09

反正准确为原则吧

0

逆天一棍

第7楼2013/10/10

确实是如此
吕梁山(shih20j07) 发表:梯度洗脱是没有办法的办法啊

0

逆天一棍

第8楼2013/10/10

不是吧？

建议用博纳同类型的色谱柱试试。
冰火女孩(xuwanxiu2006) 发表:这峰型怎么这么好，我们刚换的柱子峰型也没有这么好过。

0

逆天一棍

第9楼2013/10/10

是的。梯度洗脱，在节省时间、试剂、能源、经济上还是比较划得来的。
dahua1981(dahua1981) 发表:梯度洗脱还是省时间的

0

逆天一棍

第10楼2013/10/10

这个是必须的！
吕梁山(shih20j07) 发表:反正准确为原则吧

0

查看更多

近期热榜

热门活动

猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐

品牌合作伙伴

日立科学仪器

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

日本电子株式会社

赛默飞世尔科技

马尔文帕纳科

上海仪电科仪

梅特勒托利多

布鲁克核磁

举报帖子

点赞用户

好友列表

加载中...

正在为您切换请稍后...