毛细管电泳分离影响因素及条件优化
By flysky97
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原文来自本论坛“Nini2006”版主发的一篇帖子,毕业论文时深感其中精妙高深,遂加以整理,并加入箭头标志,希望大家进一步确认!
原文见链接:
【分享】电渗——不可不知关键参数
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20130117/4520944/
分离条件的优化是电泳实验中最重要也是最难的工作。可按以下途径入手:分析样品的来源、类型、组成及其生物和理化性质;据样品的性质,选择分离模式,确定检测方法;据样品解离常数计算最佳pH;据所需pH选择缓冲体系,进一步优化pH、缓冲液浓度等;优化其他参数,如分离电压和温度等;确定是否需要添加剂或非水溶剂等。
对于实验条件的优化,影响分离的因素非常关键。缓冲溶液的类型、pH、浓度(离子强度)等是最为重要的几个因素。相同的 pH下,不同缓冲体系的分离效果可能相差甚远。缓冲试剂及pH调节剂的浓度也需要优化。缓冲溶液要有一定的pH调节范围和足够的缓冲容量;尽量选择浓度高而产生电流小的缓冲溶液;缓冲液的表观淌度(单位电场强度下离子的平均电泳速度称为淌度)与样品组分接近。分离效果的评价上需关注电渗流、分离速度、分离选择性、分离度等。
flysky97
第4楼2013/10/09
老大可以看看我之前加有机溶剂和SDS浓度对比的实验,
毛细管胶束电泳-二极管阵列快速分离和检测五种瘦肉精类药物
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20121231/4477359/
总之对实验结果影响非常之大!