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峰形不好，上尖下款不对称，拖尾因子，分离度达不到！

张武帝

2013/10/22

液相色谱（LC）

大侠们好，现在我在做本咋氯胺方法验证，分离度，理论塔板数，拖尾因子，必须达标！现在都达不到，现在请高手帮忙看看！这个峰怎么办！该怎么调！

检测器：UV

柱子：C18 4.6*150 mm 3.5 um

流动相：0.02 mol/L庚烷磺酸钠水溶液（含0.1%三乙胺，pH 3.45）4-5-乙腈（35∶65）

流速：1.5 mL/min

柱温：40 oC

检测波长：210 nm

现在我流动相的比例调成32,、30、28都没有用；柱温调高野没有用，流速也调了没用，还请专家们指点下啊！该怎么调，柱子、检测器换不了！下面我附上谱图专家们看看呢！

也可以联系我QQ：30465708

图片上传不了，我上传附件么！专家们请看看！谢谢！

附件：

谱图.zip

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xhwy2010

第1楼2013/10/22

可以试试以下方法：
1.将庚烷磺酸钠浓度调高（调到0.05mol/L）；
2.水相中加一些磷酸二氢钠（0.05mol/L),再调节到pH 3.45；
3.调节一下PH,比如调节到pH 3.0。
4.方法1+方法3或方法2+方法3

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大空

第2楼2013/10/22

同意你的思路，这样的问题主要还是从流动相调整来解决问题，感觉调pH可以先独立尝试一下，毕竟盐多了也不是个事儿~
xhwy2010(xhwy2010) 发表:可以试试以下方法：
1.将庚烷磺酸钠浓度调高（调到0.05mol/L）；
2.水相中加一些磷酸二氢钠（0.05mol/L),再调节到pH 3.45；
3.调节一下PH,比如调节到pH 3.0。
4.方法1+方法3或方法2+方法3

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张武帝

第3楼2013/10/23

我试了，都没有用！是不是柱子问题？或者换缓冲盐？换什么呢？

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zhoujin83

第4楼2013/10/24

楼主你的峰高是5mv，也就是5000mau，峰太高了，拖尾因子不好是正常的，你将样品浓度减少5倍再看看。

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