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常见的菌种保藏方法

食品毒素/微生物检测

  • 定期移植法(也称传代培养保藏法)

    将菌种接种于适宜的培养基中,待生长充分后,于4℃-6进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。

    液体石蜡法(也称矿物油保藏法)

    是定期移植保藏法的辅助方法。将菌种接种到适宜的斜面培养基上,在最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡,使其覆盖整个斜面,再直立放置于4℃-6保存的一种保藏方法。

    瓷珠保藏法

    将培养好的微生物细胞或孢子制成悬浮液,转入装有无菌多孔玻璃珠(或瓷珠)的无菌瓶中,使其吸附于玻璃珠表面,去除多余的悬浮液,低温冷冻保存的一种菌种保藏方法。

    -80℃低温保藏

    将菌种保藏在-80℃冰箱的一种保藏方法。原理是低温条件可减缓微生物的新陈代谢,以达到长期有效的保藏微生物。
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  • aaaa2012

    第1楼2014/03/21

    常见菌种保藏方法操作:
    液体石蜡法(也称矿物油保藏法)
    将欲保存菌种接种到最适宜的培养基上;
    选择纯净优质石蜡油,经121℃,30分钟灭菌,灭菌后将其放烘箱中(160℃左右)干热处理,除灭菌时渗入的水分;
    待石蜡油变得清澈透明后,冷却即可加入斜面,斜面上不能出现气泡,液蜡添加量以高出斜面顶部约1cm左右为宜;
    密封后保藏,保藏温度要求在4~6℃。
    瓷珠保藏法
    将直接2mm-3mm的瓷珠分装到小螺帽管中制成冷冻管,高压灭菌;
    标记冷冻管,并在无菌条件下打开冷冻管;
    将待保存菌株的新鲜培养物接入培养基中,制成菌悬液后,将菌悬液接入冷冻管中;
    拧紧管帽,来回颠倒四到五次。勿使用涡旋振荡器;
    待菌株吸附到瓷珠上后,将多余菌悬液吸出。
    -80℃低温保藏
    将培养好的菌种制成高浓度菌悬液(108~1010CFU/mL);
    取灭菌甘油与菌悬液充分混匀,使甘油浓度约为20%;
    混匀后分装入冷冻试管或安瓿中,于-80 ℃超低温冰箱中保藏。
    菌种保藏注意事项:
    适宜的培养基(定期移植法与液体石蜡法):
    细菌--营养琼脂;
    真菌--PDA;
    乳酸菌--MRS培养基;
    厌氧菌--庖肉培养基;
    嗜盐性弧菌--含3%NaCl的TSA或营养琼脂;
    适宜的温度:
    根据菌株特性在适宜的温度下保藏。如:副溶血弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌等致病弧菌,室温(25℃以下)保存,不能冷藏。
    适宜的氧气条件:
    根据菌株特性,提供适宜的氧气条件,如微需氧条件或厌氧条件。

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  • 靖银楼

    第2楼2014/03/22

    这样的内容还不错啊。

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  • aaaa2012

    第3楼2014/03/22

    有用就好

    靖银楼(v2842475) 发表:这样的内容还不错啊。

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  • 靖银楼

    第4楼2014/03/23

    aaaa2012(v2830723) 发表:有用就好

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  • aaaa2012

    第5楼2014/03/23

    这种笑法是不是说明用处不大

    靖银楼(v2842475) 发表:

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  • 靖银楼

    第6楼2014/04/09

    你理解偏了吧。

    aaaa2012(v2830723) 发表:这种笑法是不是说明用处不大

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