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替米考星ELISA检测试剂盒

reagen56

2014/05/05

私聊

兽药/抗生素检测

概述

REAGEN^™替米考星酶联免疫反应测试盒适用于麸皮、鸡蛋、蜂蜜、肉/肝/肾、牛奶和尿样中替米考星残留的定量检测。该试剂盒特点包括：

Ø 快速(10-40分钟)，不需要有机溶剂，高回收率(＞80%)的提取方法。

Ø 高灵敏度（0.25 ppb）。

Ø 高重复性。

Ø 检测过程只需要不到2小时。

试剂盒原理

REAGEN^™替米考星酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联免疫反应原理，含有替米考星的抗原已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同特异性一抗共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物，会竞争一抗，抑制抗体与板上包被的药物抗原结合。加入酶标记的二抗，形成包被抗原-抗体-酶标二抗复合物。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。

检测过程

以下为计算份量的表格，用户可根据自己的需要来确定需要配置多少试剂。

试剂
每个反应需要的体积
24次反应的体积
一抗
100 mL
2.4mL
二抗工作液
150 mL
3.6 mL
工作洗液
2 mL
48 mL
终止液
100 mL
2.4 mL
底物
100 mL
2.4 mL

（1）加入50mL的标准品或样品于所设定的孔中；

（2）在每孔中加入100mL一抗，轻轻摇动微孔板混匀1分钟；

（3）室温（22.5±2.5）°C避光孵育30分钟；

（4）洗板3次，每次加入250mL 1×洗液，最后一次尽量甩干并在吸水纸上吸干；

（5）每孔加入150mL1×二抗（避免阳光直射和工作台温度过低，孵育时适当覆盖微孔板）；

（6）室温（22.5±2.5）°C避光孵育30分钟；

（7）洗板3次，每次加入250mL1×洗液，最后一次尽量甩干并在吸水纸上吸干；

（8）加入100mL的TMB底物（底物本身无色，出现颜色变化不能使用）；

（9）室温（22.5±2.5）°C避光孵育孵育10-15分钟，加入100mL的终止液终止反应，在450nm下读OD值(读数前使用无绒布擦拭微孔底部水分和指模)。

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一抗	100 mL	2.4mL
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工作洗液	2 mL	48 mL
终止液	100 mL	2.4 mL
底物	100 mL	2.4 mL