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关于western 实验

  • 小肉金刚
    2014/08/15
  • 私聊

电泳仪

  • 我前几天做western 实验,膜是用ECL染色的,感觉样品刚拍的时候信号很强,但是第二天重新拍就会发现信号比原来猝灭的很快,是怎么回事啊?求高手指点。
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  • 北京赛智

    第1楼2014/08/15

    1、含HRP的抗体
    抗体是很重要的一方面因素,对抗体方面来说,建议你适当降低抗体的浓度,看是否有改善;
    2、做western实验时快速操作能缓解“淬灭”的问题,而且在样品拍摄期间一定要保证膜不能干,否则拍摄效果很差;
    3、另外,对发光试剂ECL试剂来说,除过氧化物因接触空气被逐渐还原外,ECL的成分通常都不稳定,我们实验室原来用过自配的A液和B液,初用效果还行,用一段时间就明显感觉还是不如大牌子的效果好啊,建议你选用市售发光稳定的发光试剂来解决“淬灭”的问题,有些试剂贵点也有它贵的道理呀。

    希望赛智可以帮助您。

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  • lkjj11

    第2楼2014/12/20

    楼上的解释很清楚了

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