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【原创】【原创】诊断芯片制备过程的SOP三

labonchip

2006/09/05

生命科学仪器综合讨论

二、对照血清
1. 阴性对照血清：
将正常人血清（40份）混和均匀，加入终浓度为0.02%的硫柳汞钠盐，分装后贴标签，注明名称、批号、数量和生产人员，-20℃保存。以100 µl/瓶分装，封盖，贴标签，注明名称和批号，2~8℃保存。
2. 阳性对照血清：
将HBV和HCV阳性血清分别加入终浓度为0.02%的硫柳汞钠盐，分装后贴标签，注明名称、批号、数量和生产人员，-20℃保存。以100 µl/瓶分装，封盖，贴标签，注明名称和批号，2~8℃保存。
三、试剂盒的组装规程
10人份试剂盒的内容如下：
玻璃芯片 10 份/盒
核酸抽提液 1.5 ml /盒
异丙醇 2.5 ml /盒
70%乙醇 5 ml /盒
反转录试剂 225 µl /盒
SuperScriptII 5µl /盒
PCR-mixtureⅠ 400ul/盒
PCR-mixtureⅡ 200ul/盒
探针标记试剂 10µl /盒
Taq酶 15µl /盒
杂交试剂I 66 µl /盒
杂交试剂II 66 µl /盒
100×洗涤浓缩液 2ml /盒
阴性血清 1ml /盒
四、仪器设备（使用方法见附录）
1. MJ Research PTC-225 PCR仪
2. Cartesian Pixsys 7500点样仪
3. ScanArray 3000扫描仪
4. Robbins Scientific Model 1000 杂交箱
5. 水浴锅
6. UVP紫外交联仪
7. Gilson 移液器
五、材料与试剂
1．材料
1) 1.5 ml eppendorf管、0.5ml eppendorf管、Tip头、500 ml烧杯、试剂瓶、移液管、染色架、染色缸（国产）；
2) poly lysine玻片（Sigma公司）；
3) Silylated 玻片（Cel Associate, Ltd）；
4) probe-clip 杂交舱（Sigma公司）
2．试剂
1) Taq酶由生工公司提供。
2) dNTP由Promega公司提供。
3) agarose（琼脂糖）由上海东海制药厂生产。
4) 异丙醇由中国医药（集团）上海化学试剂公司生产。
5) 乙醇由上海振兴化工一厂生产。
6) 十二烷基磺酸钠（SDS）由生工公司分装进口试剂。
7) 琥珀酸酐, 1-甲基2-吡咯烷酮和硼氢化钠由Sigma公司提供。
8) 柠檬酸三钠由中国医药（集团）上海化学试剂公司生产。
9) Micro-Spotting solution由Telechem公司提供。

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labonchip

第1楼2006/09/05

怎么没人来看

0

leotron

第2楼2006/09/05

非常好,支持鼓励原创内容.为了内容的完整性,该贴内容也合并至:【原创】诊断芯片制备过程的SOP一

0

kongshengyi

第3楼2006/10/16

好资料，收藏。
有什么问题的话各位给些指教！

0

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