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【参数解读总结篇】毛细管电泳仪的技术参数解读与使用

  • 老多_小多
    2014/11/21
    • 私聊

毛细管电泳（CE）

  • 毛细管电泳仪主要部件有0～30kV可调稳压稳流电源，内径小于100μm(常用50～75μm)、长度一般为30～100cm的石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。检测器有紫外/可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器，前者最为常用。进样方法有电动法(电迁移)、压力法(正压力、负压力)和虹吸法。成套仪器还配有自动冲洗、自动进样、温度控制、数据采集和处理等部件。

    由于毛细管电泳有很多分离模式，所以不同仪器差异会很大。有些是普遍适用型，有些则具有专一性，只适用于某种模式或者某种物质的分离分析。普遍适用型的如Agilent 7100，Beckman PA800 plus，专一性的如毛细管电泳液相色谱一体机，这个就只能做电色谱（CEC），类似于HPLC，通常需要有填充物质，但又比HPLC多了个高压系统。再比如iCE280分析仪，其实是一台成像毛细管等电聚焦电泳仪，只能用于蛋白质的分离分析，分离模式固定为毛细管等电聚焦电泳（cIEF）。

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    请您来解析：

    1、空气制冷和冷凝液制冷，哪个效果更好？
    冷凝方式，液体冷凝会比较稳定，液冷效果好。只是这样一来还要另外买冷凝液，增加分析成本。

    2、注意过样品盘的温控范围吗？你的仪器范围多大？什么范围内才比较好？
    控温范围直接决定了仪器的适用范围，控温的准确度又决定了重现性的好坏，所以，这个参数至关重要。
    安捷伦的样品温度最低高达10度，如果做生物样品的话就被动了。beckman最低4度，比较有优势。我见过最低温度的是Lumex的毛细管电泳仪，低到-10度。控温的最高值也值得关注，如果毛细管堵住了的话，常温经常冲洗不了，这是提高温度往往会有惊喜（越高越好）。

    3、毛细管出口端的长度什么情况下会对分离分析产生重要影响？如何评价毛细管的质量好坏？
    出口端长度是指的是窗口到出口端的距离吗？会影响场强和进样量。在出口端进样模式下，出口端的长度有重要意义，因为较长的有效距离能够提供更好的分离度。

    4、影响仪器分离度的因素有哪些？仪器的哪些参数会影响分离度？
    电压、温度、管长、管内径、溶液等；仪器的温度、电压等会影响。

    5、目前市场上已有一些用途比较专一的毛细管电泳仪，比如毛细管电泳液相色谱一体机和毛细管等电聚焦电泳仪等。普通毛细管电泳仪如Agilent 7100和Beckman PA800 plus等也能完成以上这两种特制仪器的工作吗？
    可以的，还可以和质谱联用。

    6、谈谈你的CE仪在使用过程中容易出现的问题和解决办法。
    常见的是管子容易断或者污染什么的，解决办法就是“换”和“洗”。SDS-MEKC很容易有气泡，解决办法就是超声。如果毛细管里面有气泡，引起断流，断流后如果不及时发现，积聚的热量就有可能烧坏毛细管。


    欢迎大家参与讨论，补充自己想交流的参数，说说自己的认识或者提出自己的疑问！！！

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  • wy20071722

    第1楼2014/11/21

    多谢大师傅指导！又知道了一种发精品帖的方法。

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  • lsyecspc

    第2楼2014/11/22

    应助达人

    原来单位里买了一台国产的毛细管电泳仪。想做抗生素生产过程中及成品中的蛋白质，因为空毛细管分离效果不好，想买带填料的毛细管一直没买到，加上人员的关系，仪器一直没用起来。不知道大家有没有用毛细管电泳做物料里的蛋白质的，都用的什么柱子。

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  • 老多_小多

    第3楼2014/11/24

    有很多讨论，有很多问题，汇总整理是很有必要的

    wy20071722(wy20071722) 发表:多谢大师傅指导！又知道了一种发精品帖的方法。

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  • nini2006

    第4楼2014/11/24

    师傅在发帖技巧这方面的知识可渊博了，一定要连哄带骗的套他多教几招才行。

    wy20071722(wy20071722) 发表:多谢大师傅指导！又知道了一种发精品帖的方法。

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  • liming1991

    第5楼2014/12/04

    激光诱导荧光检测器和电化学检测器这两种检测器能够检测什么物质。

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  • nini2006

    第6楼2014/12/04

    能够检测有荧光的有机物，不过本身带荧光的有机物非常少，所以这个方法基本都需要衍生。

    liming1991(v2873071) 发表:激光诱导荧光检测器和电化学检测器这两种检测器能够检测什么物质。

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