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HBeAg预包被板CV检

fengdaox

2014/12/18

HBeAg是乙肝e抗原，通常我们说的乙肝3号就是它。健康人在ELISA检测试剂检测中是阴性，下面我们介绍的就是该类试剂盒中预包被板的精密性见，即CV。该指数有衡量预包被板均一性，每孔间差异的作用。为避免广告嫌疑，均挡住了商标，如有漏出，纯属无意。下面先上图说明书

因为是检验半成品CV，所以酶标记物和板条及阳性对照不必使用同一批号。

下面是预包被板

酶标记物

阳性对照

在说明书中可看到阳性对照的OD值在2.0以上，而我们做CV为了保证效果，会采用3倍OD值至8倍OD值的阳性。所以对于阳性对照要稀释，根据以往经验，稀释15-20倍即可。下面就是稀释液，阳性对照阴性对照及酶标记物均采用该稀释液配制。

稀释液是没有颜色的，根据不同的用途，我们会在酶标记物和阳性对照中加入不同的红色素，而在阴性对照中加入绿色素。在这里没用到阴性对照，故未拍摄照片。

下面将稀释后的阳性对照与酶标记物1:1混合均匀。倒在用PE手套盖住的板盖上。有加样槽，我更习惯与板盖。个人喜好而已。

调节加样器至100微升

检查预包被板包装完整性

撕开包装袋，取出板条

观察板孔透光性是否一致且无污迹。

加样

加样过程时刻注意枪头里的液量是否正常。如有气泡，应排净，对于无法排净的更换枪头。

最左侧的有明显气泡，会导致液量不足。

加完96孔后，盖上盖子，放入37℃温箱，孵育30分钟计时。

设置洗板机参数，准备下步洗板显色。

洗6次，8条，每孔350微升。

30分钟后，取出板条，放入洗板机。

洗板结束后，在卫生纸上排干。先每孔加入50微升底物缓冲液后，再每孔加入50微升底物液。

震荡3-5秒后，放入37℃温箱，孵育15分钟。

15分钟后，用排枪加终止液，每孔50微升。

蓝色是未加终止液的，黄色是加入终止液的，终止液本身无色透明。

终止后效果

拿去读数，双波长450nm/620nm。

计算CV。

打印结果。

整板平均OD值0.770；最大OD值0.874,；最小OD值：0.690。

最右侧下面的就是整板CV，4.55%。要求是15%以内。OK!该项目合格！

把板条放入消毒液进行无害化处理就可以了。

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土老冒豆豆

第1楼2014/12/19

应助达人

楼主的原创不错，图片很多，而且给大家展示了这个比较冷门的检测项目。我建议题目改的大众易懂些，比如：《检测乙肝疫苗检测盒》，您看可以吗，我就按照这个题目推荐上首页了哦？

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fengdaox

第2楼2014/12/19

多谢多谢，往后我会多发原创的！哈哈
土老冒豆豆(土老冒豆豆) 发表:楼主的原创不错，图片很多，而且给大家展示了这个比较冷门的检测项目。我建议题目改的大众易懂些，比如：《检测乙肝疫苗检测盒》，您看可以吗，我就按照这个题目推荐上首页了哦？

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zyl3367898

第3楼2014/12/22

应助达人

检测乙肝疫苗的有效性吗？

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fengdaox

第4楼2014/12/23

不是简单的对于疫苗有效性检验，e抗原更体现乙肝传染能力的强弱。单独检验疫苗的有另个试剂盒，见后期原创。
原文由zyl3367898发表：检测乙肝疫苗的有效性吗？

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