JOE HUI
第1楼2024/08/29
如果想测定样品中核糖核酸的含量,可以采用定糖法。
定糖法的原理是:核糖中的戊糖可在浓盐酸或者浓硫酸作用下脱水生成醛类化合物,该化合物可与某些成色剂缩合成有色化合物,可用比色法或者分光光度法测定其溶液中的吸收值,在一定的浓度范围内,溶液的吸收值与核酸的含量成正比。
具体操作如下:
1.?核糖的测定:生成的绿色化合物在λ=670nm 处有最大的吸收值。
2.?脱氧核糖的测定:DNA 中的脱氧核糖可在浓硫酸作用下脱水生成ω-羟基-γ-酮戊酸,该化合物可与二苯胺生成蓝色化合物,在λ=595nm 处有最大吸收值。
该方法的优缺点是:较灵敏,但特异性较差,凡戊糖都有此反应。