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液相色谱出现不正常的分叉峰 求解

  • 简单爱一
    2015/01/15
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 最近段时间在做标准品方法学考察 前期一直是用供试品跑的图谱 因为要做指纹图谱 供试品连续做了十几批次峰形很好,分离度也不错。之前标准品也跑过,是进样20ul的 后来因为要做标准曲线 进了一次5ul的就成这样了







    然后改进30ul的图谱



    觉得30ul峰可以了又改进5ul的



    进了次20ul的



    突然间人品爆发 20ul的进样量峰图 连续六针都是这样



    最近20ul的进样量又成这样了。。



    色谱柱 在线过滤器都换了 不行。。 检测能量也很高 流动相没变 柱温没变都是过膜超声的 求大神!
  • 该帖子已被版主-夏天的雪加5积分,加2经验;加分理由:鼓励发帖,发图有奖
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  • 夏天的雪

    第1楼2015/01/16

    应助达人

    楼主待测物质附近始终有个小的干扰物质存在,进样体积小时,由于主峰的响应值小,所以干扰物质的峰特别明显,进样量为30时主峰可能将此小峰给屏蔽了,进样20ul干扰峰的再次出现,可能与柱性能下降或者流动相等色谱条件变化有关,觉得楼主还是先要调整一下色谱条件

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  • wslmpol

    第2楼2015/01/16

    同意楼上的说法,前面的7张图里拖尾峰应该是杂质。最后两张图可能是杂质和目标峰没分开,你这几张图是用同一个标准品跑出来的么?

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  • slmu3404

    第3楼2015/01/16

    首先,排除是否是两个峰未分开。可以换根长柱稍低点流速走下,如果两个峰分的更开,应该是两个物质。
    如果还是一个峰,调整流动相PH,可能物质状态不稳定。导致峰型异常。
    另外色谱柱效下降也会导致出现异常峰。

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  • hnteng

    第4楼2015/01/18

    改色谱条件。
      你的第4张图就可以看出有干扰。

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  • 浪淘沙隐

    第5楼2015/01/19

    流动相是什么,有缓冲能力吗?供试品又带有酸碱性吗?

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  • 简单爱一

    第6楼2015/01/27

    已找出问题 洗针液浓度不够

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  • yuechunguang

    第7楼2015/01/27

    洗针液浓度不够?明天去公司看看哦,因为我之前一根柱子走出来的峰和第一二张类似,想着是柱效下降,要反冲一下柱子,最近测试多,还没处理,

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