色谱峰拖尾，求指点

可能是色谱柱 问题

不知楼主测的什么物质？
　
　　从你的色谱条件中，我感觉有几点不太合常规：
　
　１　柱温过高。通常我们很少设到５０度的。大多是在２５度到４０度之间。就我个人而言，我一般不会超过３５度。
　２　流速不合适。4.6mm的常规柱子，最佳流速是1.0ml/min。不要总是去调流速。对液相而言，最能影响保留行为是的流动相，而不是柱温和流速。我们做液相，流速是一般就是固定在1.0ml/min不变的。除了在流动相上大做文章外，也就偶尔改改柱温。
　３　流动相太复杂。我不知你的样品是否在用某文件规定的标准方法做还是自己开发方法？如果是自己开发，一定要搞缓冲盐。我用缓冲盐，通常会选醋酸盐（物质吸收在230nm以上），只有万不得已才会用磷酸盐。
　你的样品可能是碱性的。我觉得可以试试加千分之一的三乙胺。

有点色谱柱过载，进样量太大！

感觉可以综合考虑2楼3楼的意见。从容易的开始吧，把样品浓度提高并减少进样量，如果不行再换色谱参数，如2楼所说。

应助达人

减小进样量，样品可以稀释后进样

应助达人

谢谢你的回答：

1 柱温，检测器为RI，标准中给的温度为50，可以考虑降到40，柱温与检测器温度需要保持一致。

2 流速：对于4.6 mm色谱柱的最佳流速为1我是知道的，只是这是上面给下的方法，我只能先按照他的方法做，再一点点的改动。

3 流动相：有机相加pH为2.5Buffer，到时不觉得有多复杂，磷酸盐对峰形改善效果应该会更好点吧，至于紫外吸收，我用的是RI（示差折光检测器），这方面不会有影响的。

样品为盐酸盐，pH为5.8，为何你会觉得是碱性？

应助达人

0.28 mg/mL应该还好吧，再说过载应该会出现的是平头峰，不是这么厉害的拖尾吧

0.28mg/mL也不算低了，毕竟进样50μL呢。过载也有可能拖尾的