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看图解读畅谈之五:色谱柱填料硅胶键合

  • 一片枫叶
    2015/03/23
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 1:C18简称:ODS柱,即18烷基键合硅胶填料,由于C18是长链烷基键合相,有较高的碳含量和更好的疏水性,具有广泛的应用。C18柱选用的原则:选用经过烷基化封尾的填料,可以防止碱性化合物的拖尾现象。选用含碳量高的柱子,可以增加保留。选用较短的柱子可以提高分离效率。选用小颗粒度的填料可以提高分离度。对于分子量大的组分,选用大孔径填料的柱子。
    2:C8 C4 等短链烷基键合相适合做极性小,以减弱保留,缩小分析时间。
    3:苯基柱:柱上由于苯基的存在也属于反相柱,不过苯基有不同的物理特性是分析同时含极性和非极性复杂混合物的最佳选择。
    4:氰基柱属于中等极性基团,正相反相都能应用。其在用于正相色谱时,可使用如正己烷的低极性流动相,在用于反相色谱时,可使用甲醇或水的强极性流动相,适用于ODS上分离时间太长的组分的分离,以及在ODS上最优化色谱非常困难的场合。

    请各位朋友根据以上的描述以及亲身的经历和体会,对上述几种不同类型的色谱柱发表自己的观点,找出它们的使用范围和使用的注意事项。
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  • 一片枫叶

    第1楼2015/03/23

    应助达人

    硅胶上的硅羟基 硅烷键合相 填料封端三者的关系是一个很有意思的问题,

    氨基柱的特点:
    1:氨基柱是一个不稳定的柱子,并不是常用拄,这是应为键合的氨丙基很容易水解,
    2:正相反相都可以使用,
    氨基柱的使用范围
    1:在反向系统中,氨基柱的保留较弱,一般用于烃基和石油馏分的分离,分析。
    2:在正向系统中,通常在氰基柱无法分离重叠峰时,才考虑氨基柱。
    使用氨基柱的注意事项
    作为反相拄时要考虑流动相的PH值范围,PH值越低越容易水解,流动相中水的比例越高,也越容易发生水解。
    长期不用时,要清洗后保存在有机相中。
    分析完酸性物质后,氨基有可能质子化,导致拄效下降,可以用氨水/甲醇=50/50的水冲洗该柱,冲洗后,在用不含有碱的流动相洗去多余的氨。

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  • 老多_小多

    第2楼2015/03/24

    苯基柱和氰基柱没有用过
    氨基柱倒是用过,楼主没有列
    C4很少吧

1
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  • 夏天的雪

    第3楼2015/03/24

    应助达人

    C18用的最多了,其他几种色谱柱实验室也有,但是用的很少

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  • 一片枫叶

    第4楼2015/03/24

    应助达人

    苯基柱可以使C18柱不能分离的组分,特别是其一带有苯环而极性差别不大的组分得到很好的分离。

    老多_小多(emoc98311) 发表:苯基柱和氰基柱没有用过
    氨基柱倒是用过,楼主没有列
    C4很少吧

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  • 夏天的雪

    第5楼2015/03/24

    应助达人

    氨基柱用在反相时,如何清洗色谱柱,用完保存在哪种有机相中呢

    老多_小多(emoc98311) 发表:苯基柱和氰基柱没有用过
    氨基柱倒是用过,楼主没有列
    C4很少吧

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  • 一片枫叶

    第6楼2015/03/24

    应助达人

    C18硅烷键合硅胶色谱柱键合相的侧链位阻不同,封尾技术不同,色谱柱也会表现出不同的选择性和不同的酸碱度使用宽限。

    夏天的雪(bingwang228) 发表:C18用的最多了,其他几种色谱柱实验室也有,但是用的很少

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  • 一片枫叶

    第7楼2015/03/24

    应助达人

    氰基柱在反相模式下,对于极性较强的组分有较好的保留,而C18对于极性组分没有保留。氰基柱能够把极性和非极性的混合组分得到分离。也可把极性组分在反相模式下进行分离。

    老多_小多(emoc98311) 发表:苯基柱和氰基柱没有用过
    氨基柱倒是用过,楼主没有列
    C4很少吧

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  • 夏天的雪

    第8楼2015/03/24

    应助达人

    是的,C18其实是很笼统的称呼,工艺、封端、建和等技术的不同产品差异性很大,这些也是价格差异大的原因

    一片枫叶(v2960432) 发表: C18硅烷键合硅胶色谱柱键合相的侧链位阻不同,封尾技术不同,色谱柱也会表现出不同的选择性和不同的酸碱度使用宽限。

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  • 一片枫叶

    第9楼2015/03/24

    应助达人

    反相使用时,如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;长期不用时需用甲醇—异丙醇—氯仿置换,最后用正己烷保存。

    夏天的雪(bingwang228) 发表: 氨基柱用在反相时,如何清洗色谱柱,用完保存在哪种有机相中呢

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  • 一片枫叶

    第10楼2015/03/24

    应助达人

    氨基柱的特点及注意事项已补上。

    老多_小多(emoc98311) 发表:苯基柱和氰基柱没有用过
    氨基柱倒是用过,楼主没有列
    C4很少吧

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