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含抗生素平板培养基的配制窍门

化学药检测

  • 实验室工作7年了,很多人问我怎要才可以把实验做好,做得漂亮。对于这个问题,我再看看到很多做事毛糙,手忙搅乱的师弟师妹时,只能笑而不语。生物实验不是化学实验,很少会爆炸,真的没必要慌乱,和很多工作一样,需要用“心”去做。
    不说废话,回归正传。今天谈谈“含抗生素平板培养基的配制窍门”。当然,对于很多做这个实验做得炉火纯青的同行,实在没必要看下去了。下面写的只是供那些在这个环节不太了解的朋友看。
    基本步骤如下:
    A.琼脂、蛋白粉、无机盐、…..去离子水….等等,混匀,溶解,具体成分看你培养神马菌了;
    B. 120度,高压灭菌;
    C. 加抗生素,加神马抗生素,看你要筛选神马菌,氨苄青霉素?链霉素?潮霉素B?
    D. 倒平板。
    别以为这个大家都会。讲一个真实故事给大家听,以前有一个做实验也是蛮拼的同学,要做含青霉素的筛选平板培养基,他一次不成功,就做第二次,但是还是不成功,一直做了2个月还是不成功。。。他的科研热情实在值得学习,只是财力不是很雄厚的老板实在伤不起。我们好奇,怀疑他没加青霉素,就问他加了没,他回答时也很有底气,自信地告诉我们,加了,加了不少------可惜都是在高温灭菌前加的!如此高温,哪家的抗生素不分解啊?
    在这里,我想强调的是,加抗生素,除了要选择时,还要择温度!加抗生素必须在灭菌之后加,加的时候一定要等琼脂培养基凉下来再加。温度降到什么时候为宜呢?就是45~50度的范围。当然,有些牛人,靠手摸,感觉不烫,就刚好是45~50度。作为搞科研的,我不推荐用这种方法。我推荐大家用恒温循环水浴。建议不要用国产的水浴,因为隔壁实验室发生过漏电事件……我用过几个进口品牌,发现德国IKA的恒温水浴最好,安全,精准,好用。可惜当时递交采购单时太草率,就选了一个基本型的ICC恒温水浴。五楼的小黄老师有钱就这么任性,挑了个IKA控制型,可以远远的无线控制~~听说无线控制距离可达10米~~~
    45~50度是一个很合适的温度,一方面可以保持抗生素的活性,另一方面,琼脂在这个时候不凝。轻轻晃动几下培养基,让抗生素混匀,切忌不要使劲,否则起了起泡就很难看了。后续,只要小心的把培养基倒到培养皿上,于是高质量的含抗生素的培养基就做好了~

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  • 又又1990

    第1楼2015/06/15

    配制窍门分享,非常感谢!欢迎您常来分享哦!

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  • 云雀

    第2楼2015/06/15

    经验无价,多谢分享~~~

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  • 青林

    第3楼2015/07/15

    勤奋是好事,但不思考问题的本质就很可怕了

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