尾吹气对分离测定有何影响，为什么要设定尾吹气？

原因
在色谱柱末端到检测器之间有一个死空间，称为柱后死体积，是由检测器的体积、形状等因素引起的。柱后死体积和检测器死体积会影响毛细管柱的柱效和色谱图峰形。但用填充柱时因载气流量大而影响不大，因而填充柱可不加尾吹气；而使用毛细管柱时则要加尾吹气，使样品快速到达检测器，来消除柱后死体积的影响，保证检测器高灵敏度工作。
例如，假设色谱柱末端到检测器之间有12μL的死体积，当填充柱以36mL/min的载气通过时需要0.02s，而毛细管柱以1mL/min的载气通过时则需要0.72 s，所需时间是填充柱的36倍。对于填充柱，0.02 s的停留时间不影响柱效和峰形，但是对于毛细管柱，0.72 s的停留时间对柱效和峰形会带来很大的影响，因此毛细管柱因连接困难造成死体积打，一般要加尾吹气。
尾吹气对分离测定的直接作用，主要有以下两点：
① 提高检测器响应值和响应速度；
② 改善色谱峰形。

解决方案
毛细管柱设置尾吹气，保证了检测器的最佳工作条件，能快速将样品组分吹送入检测敏感区，消除了检测器死体积的柱外效应，从而消除了柱后死体积对分离测定的影响，因而达到了改善柱效和色谱图峰形的效果。对于毛细管柱，尾吹气是一路重要的气体，要根据所用检测器类型和色谱柱的内径尺寸，来确定设置的尾吹气流量。同时，有时候为了分析的需要，需要仪器在比平常更高灵敏度条件下工作，还需要进一步优化尾吹气等各路气体。
通常情况下，氢火焰离子化检测器（FID）、火焰光度检测器（FPD）、热离子化检测器需要柱内载气和尾吹气流量之和约30mL/min。当常规毛细管柱分流后流量为2mL/min 时，用氢火焰离子化检测器需要流量约30mL/min 的尾吹气。同样是氢火焰离子化检测器（FID），当用大口径毛细管柱时，柱内流量上限可达到15mL/min，因此需要15mL/min以上的尾吹气。
要准确设定好尾吹气流量，还需要先知道如何测定尾吹气流量，测定方法不同仪器可能还有所差别。一般气相色谱仪，装好色谱柱后，可在检测器出口处用皂膜流量计可测得柱内载气和尾吹气流量之和，而用测定死时间的方法即可计算出柱内载气流量，从而可计算尾吹气流量；而部分仪器，由于设计上的原因，不能在检测器出口处用皂膜流量计测定载气总流量，只能拆开连接尾吹气的管路，再用皂膜流量计测尾吹气流量；对于一些高端仪器，都是采用电子压力传感器和电子流量控制器，通过计算机来实现压力和流量的自动控制，因此，每一路气体的流量都可以直接在仪器控制面板或工作站上设定、读取。

案例分析
采用瓦里安GC450气相色谱仪，CP-Sil 8CB 毛细管柱(30m ×0.25mm ×0.25μm)，载气氮气，载气柱内流量2 mL/min，进样口分流比40∶1，柱温箱温度为150℃保持1min，15℃/min升到240℃保持1min，再以10℃/min升到270℃保持10min。气化室温度240℃，检测器温度300℃。分析农药标准溶液，组分包含α-666、β-666、δ-666、γ-666、百菌清、三唑酮、异菌脲、联苯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氟胺氰菊酯、氟氰戊菊酯、氟氯氰菊酯1、氟氯氰菊酯2、氟氯氰菊酯3、氟氯氰菊酯4、氯氰菊酯1、氯氰菊酯2、氯氰菊酯3、氯氰菊酯4、氰戊菊酯1、氰戊菊酯2、溴氰菊酯。改变尾吹气流量分别设定为20 mL/min、28 mL/min、38 mL/min、48 mL/min、58 mL/min进行实验，考察尾吹气流量变化对色谱峰响应和分离度的影响。
不同尾吹气流量下获得的色谱图，见图1-图6，结果表明，随着尾吹气流量的增加，峰高逐渐减小。以百菌清、异菌脲、溴氰菊酯为例，随着尾吹气在20mL/min-58mL/min的范围内变化，色谱峰峰高变化曲线见图6，表明尾吹气流量增大，峰高逐渐降低。因为ECD工作原理上属浓度型检测器，在一定范围内，峰高响应信号值与组分浓度成正比。理论上，峰高响应信号与载气和尾吹气流速无关，但实际上，峰高响应信号与进入检测器检测敏感区的瞬时组分浓度成正比，尾吹气越大，样品组分在检测器的停留时间越短，瞬间浓度变小，组分分子来不及充分捕获电子就被吹扫出检测器，从而导致出现尾吹气流量越大，响应越低的结果。

图1 尾吹气流量为20mL/min时的组分分离图
色谱峰：1.α-666;2.β-666;3.δ-666;4. 百菌清;5.γ-666;6.三唑酮;7.异菌脲;8.联苯菊酯;9.甲氰菊酯;10.氯氟氰菊酯;11.氟胺氰菊酯12.氟氰戊菊酯;13.氟氯氰菊酯1;14.氟氯氰菊酯2;15.氟氯氰菊酯4;16.氯氰菊酯1;17.氯氰菊酯2;18.氯氰菊酯3;19.氯氰菊酯4;20.氰戊菊酯1;21.氰戊菊酯2;22.溴氰菊酯。（下同）

图2 尾吹气流量为28mL/min时的组分分离图

图3 尾吹气流量为38mL/min时的组分分离图

图4 尾吹气流量为48mL/min时的组分分离图

图5 尾吹气流量为58mL/min时的组分分离图
通过对比分析，当尾吹气流量为48mL/min时，对如氟氯氰菊酯、氯氰菊酯的异构体峰分离效果最好，分离度结果分别见表1.3和表1.4。氟氯氰菊酯、氯氰菊酯均分别有8种光学异构体:一对低效顺式、一对低效反式、一对高效顺式和一对高效反式。当色谱条件合适时，通常出四个色谱峰，依次是低效顺式、低效反式、高效顺式和高效反式，否则只能出三个峰。如当尾吹气为20mL/min时，因为柱后扩散效应存在，导致氟氯氰菊酯部分异构体重叠，只能出三个峰，而其他几种尾吹气流量增大的情况下，柱后扩散消失，均可出4个峰。
对ECD检测器而言，尾吹气流量可在10mL/min-100mL/min之间。从上面实验结果可知：尾吹气流量太小，虽然灵敏度高，但是有可能满足不了分析要求，出现峰形拖尾、分离效果稍差；尾吹气大，分离效果好，但灵敏度降低。所以需要结合样品对象的分离要求考虑，如果分离对象容易分开,但各个组分浓度很低时，应优先考虑灵敏度，选择小流量尾吹气；如果分离对象各个组分浓度高，且组分难分开，就要优先考虑分离效果，选择大流量尾吹气。ECD尾吹气流量一般选30mL/min-60mL/min之间为佳。
当然，对于不同厂家的仪器，检测器的池体大小可能有差别，因此尾吹气流量有所差别，要达到同样的分离效果，池体大的检测器需要的尾吹气大，反之就要小些。如分离同一样品，有的仪器最佳尾吹气流量是30mL/min，而有的仪器，可能是50mL/min。

图6 尾吹气对ECD灵敏度的影响

表1 尾吹气大小变化对氯氰菊酯4组分分离的影响

表2 尾吹气大小变化对氟氯氰菊酯4组分分离的影响

应助达人

尾吹气不同分离度也不同。要选择合适的尾吹气。

应助达人

这么熟悉， 又是《气相色谱百问精编》里的