食品污染物苯并芘的检测

微雨燕双飞

2015/07/09

私聊

液相色谱（LC）

苯并芘又称苯并（α）芘，英文缩写BaP，C20H12，是一种五环多环芳香烃类。苯并芘为一种突变原和致癌物质，从18世纪以来，便发现与许多癌症有关。其在体内的代谢物二羟环氧苯并芘，产生致癌性的物质；

苯并芘广泛存在于烟熏、油炸、烧烤、烘焙等食品中。欧盟、世卫组织都针对烟熏食物分别定有苯并芘不得超过5ppb和10ppb的上限标准。
我国《GB2762-2005 食品中污染物限量》明确规定，食用油标准不超过10ppb，熏烤肉不超过5ppb，粮食不超过5ppb。这和欧盟、世卫组织制定的标准其实一致的。
GB/T 22509-2008 动植物油脂苯并(α)芘的测定反相高效液相色谱法

由于国标需要使用中性氧化铝自己填装层析柱，并且需要对氧化铝的活度进行控制，因此在实际检测工作中，往往需要消耗很多的时间进行氧化铝柱的准备，而且又不能达到非常理想的回收率结果。
基于上述原因，迪马科技开发了商品化固相萃取柱ProElut BaP22 g/60 mL代替手工氧化铝层析柱的填装，简化前处理步骤，操作更简便；优化的氧化铝填料，活度已调整为Brockmann活度IV级；净化效果优异，回收率结果稳定；基质种类丰富（粮食、植物油、方便面、肉制品、水产品、土壤等），满足多行业用户检测需求。
下面以粮食、植物油、方便面、肉制品为例来说明商品化的苯并芘专用柱的检测效果
样品提取
粮食
(1) 称取1 g样品于50 mL离心管中，加入20 mL正己烷。
(2) 涡旋混合1 min，超声提取5 min，6000 rpm下离心3 min，收集上清液；
(3) 残渣再用20 mL正己烷提取，每次涡旋混合1 min，超声提取5 min ，6000 rpm下离心3 min；合并两次提取液；
(4) 在30 ℃下用减压蒸馏将提取液蒸干，然后用5mL正己烷溶解，待净化。
植物油
用玻璃烧杯称取试样，精确到，用正己烷溶解稀释，作为上样液待净化。
方便面
(1)称取1 g样品于50 mL离心管中，加入15 mL正己烷；
(2)涡旋混合2 min，超声提取5 min，6000 rpm下离心3 min，收集上清液；
(3)残渣再用15 mL正己烷按照步骤(2)重复提取一次，合并两次提取液；
(4)在30 ℃下用减压蒸馏将提取液蒸干，然后用5 mL正己烷溶解，待净化。
肉制品
(1) 称取1 g样品于50 mL离心管中，加入15 mL正己烷。
(2) 涡旋混合2 min，超声提取5 min，5000 rpm下离心2 min，收集上清液；
(3) 残渣再用15 mL正己烷提取，每次涡旋混合2 min，超声提取5 min ，5000 rpm下离心2 min；合并两次提取液；
(4) 在40 ℃下用减压蒸馏将提取液蒸干*，然后用5mL正己烷分2次溶解转移，待净化。
备注：蒸干后残留物的质量小于0.4 g，可以进行净化；如果残留物的质量大于0.4g，适当降低取样量，再重新试验。
SPE柱净化——ProElut BaP22 g/60 mL（Cat.#：65351）

(1)活化：	30 mL正己烷，流出液弃去；
(2)上样：	将待净化液加入小柱，收集流出液；
(3)淋洗：	70 mL正己烷淋洗，收集流出液，合并步骤(2)、(3)流出液；
(4)重新溶解：	在40 ℃下用减压蒸馏*将收集的流出液蒸干，然后用乙腈-四氢呋喃( 9 : 1 )溶液定容至1 mL后供HPLC分析。

色谱分析条件

色谱柱：	Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm，5 μm（Cat.#：99603）
流速：	1.0 mL/min
检测器：*	激发波长：370 nm 发射波长：406 nm
柱温：	30 ℃
进样量：	20 μL
流动相：	乙腈:水 = 97:3

粮食添加回收结果

植物油添加回收结果

方便面添加回收结果

肉制品添加回收结果

前处理注意事项
A：旋蒸过程注意以下几个参数设定：
1．真空度：156mbar 冷凝水：10℃ 水浴锅：40℃
2．旋蒸过程不能暴沸；
3．首次样品旋蒸前，先旋蒸50mL正己烷冲洗系统。
B：进行过柱时，要限制小柱流速1mL/min，我司产品不锈钢点胶针头（迪马货号：1095）
小结
1. 使用商品化的ProElut BaP22 g/60 mL固相萃取柱代替传统的手工填装的中性氧化铝层析柱，大大简化了样品前处理步骤，提升了工作效率
2. 多种基质的苯并芘检测，ProElut BaP22 g/60 mL净化后均能实现优异的回收率结果
3. 优化的氧化铝填料，活度已调整为Brockmann活度IV级，避免手动调整活动的繁琐及重现性不理想的问题