测定食品中己烯雌酚的案例

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2015/08/05

私聊

食品添加剂

一、案例
己烯雌酚(DES)是一种人工合成的激素类药物，医学上主要用于治疗雌激素缺乏症。但是其具有促进动物生长，促进动物蛋白质的合成代谢，提高动物日增重和提高饲料转化率的作用。曾被作为动物生长促进剂用于畜禽以及水产品的养殖中。但是含有己烯雌酚的肉制品能扰乱人体内的激素平衡，导致妇女更年期紊乱，女童性早熟，男性女性化，生育能力降低；国际癌症研究机构(IARC)研究发现DES是一种致癌物质，诱发女性乳腺癌、卵巢癌等。从1981年，世界卫生组织禁止使用己烯雌酚、己烷雌酚作为动物的生长促进剂。世界各国规定食品动物养殖中不得以任何途径和方式使用DES，养殖动物及动物性食品中不得检出DES。我国农业部早已明令禁止在畜牧养殖业中使用己烯雌酚及其盐、酯等。但受利益驱动，仍有部分养殖者非法使用。为保障畜产品质量安全，我国已将其作为兽药残留监控的重点对象。
二、选用的国家标准
GB／T 5009．108—2003畜禽肉中己烯雌酚的测定。
三、测定方法
1．提取及净化
精确称取5.0g绞碎肉试样，放入50mL具塞离心管中，加10.00ml。甲醇，充分搅拌，振荡20min，于3000r／min离心10min，将上清液移出，残渣中加lO.00mL甲醇，混匀后振荡20min，于3000r／min离心10min，合并上清液，此时如出现混浊，需再离心10min，取上清液过0.5μmFH滤膜，备用。
2．色谱条件
①紫外线检测器：检测波长230nm。
②灵敏度：0.04AUFS。
③流动相：甲醇+O.043mol／L磷酸二氢钠(70+30)，用磷酸调pH值至5。
④流速：1mL／min。
⑤进样量：20μL。
⑥色谱柱：CLC—ODS—C18(5μm)6.2mm×150mm不锈钢柱。
⑦柱温：室温。
3．标准曲线绘制
精确称取5份(每份5.0g)绞碎的肉试样，放入50mL具塞离心管中，分别加入不同浓度的标准液0、6.0μg／mL、12.0μg／mL、18.0μg／mL、24.0μg／mL，其中甲醇总量为20.00mL，使其测定浓度为0、0.30μg／mL、0.60μg/mL、0.90μg／mL、1.20μg／mL，按步骤一方法提取备用。
4．测定
分别取样20μL，注入HPLC柱中，可测得不同浓度DES标准溶液峰高，以DES浓度对峰高绘制工作曲线，同时取样液20μl，注入HPLC中，测得的峰高从工作曲线图中查相
应含量，Rt一8.235
5．结果计算
式中 X一一试样中己烯雌酚的含量，mg／kg；
A一进样体积中己烯雌酚的含量，ng；
m——试样质量，g；
V₁——试样甲醇提取液总体积，mL；
V₂——进样体积，mL。
6．试剂
①甲醇。
②0.043mol／L磷酸二氢钠溶液：取1g磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)溶于水，定容至500mL。
③己烯雌酚(DES)标准溶液：精确称取100mg己烯雌酚(DES)溶于甲醇，移入100mL容量瓶中加甲醇定容，混匀，每毫升含DESl．0mg，储存于冰箱中。
④己烯雌酚(DES)标准使用液：吸取10.00mL DES储备液，移入100mL容量瓶，加甲醇定容，每毫升含DESl00μg。
⑤磷酸。
7．仪器
①高效液相色谱仪：具紫外检测器。
②小型绞肉机。
③小型粉碎机。
④电动振荡器。