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HPLC的眼睛——检测器的秘密

  • 微雨燕双飞
    2015/08/07
  • 私聊

厂商论坛

  • 高效液相色谱仪是由溶剂贮液器、泵、进样器、色谱分离柱、检测器和数据处理系统几部分组成。检测器、泵与色谱柱是组成高效液相色谱仪的三大关键部件,其中检测器是高效液相色谱仪的眼睛,它将样品的物理或化学特性信息转换成易测量的电信号输入到记录仪,并记录下来,得到样品组分分离的色谱图。
    检测器的类型
    通常将检测器分为通用型和选择型2种,通用型检测器是指可连续测量色谱柱流出物(包括流动相和样品组分)的全部特性变化;而选择型检测器是用以测量被分离样品组分某种特性的变化,这类检测器对样品中组分的某种物理或化学性质敏感,而这一性质是流动相所不具备的,或至少在操作条件下不显示。如紫外检测器、光电二极管阵列检测器、荧光检测器等属于选择型检测器;示差折光检测器、蒸发光散射检测器等属于通用型检测器。检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信 号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
    各种检测器基本原理及比较如下
    表1.各种检测器基本原理及优缺点比较


    HPLC中常见检测器的基本特性如下

    表2.HPLC中常见检测器的基本特性


    检测器常见问题及解决方法

    检测器性能的好坏直接影响仪器的正常工作,其中噪声和漂移是检测器稳定性的主要表现。
    1基线噪声较大的可能原因及对策
    噪声是指由检测器输出与被测样品组分无关的无规则波动信号。对于判断基线噪声是来自检测器还是来自泵或流动相,可将泵关上, 继续走基线,如果噪声立即停止,基线呈一条直线, 说明基线噪声来自泵或流动相中的气泡, 应设法排气;若停泵后仍有噪音出现, 应检查检测器。如果上述都检查过,那需要考虑的其它问题就是:是否改变流动相的组成;是否改变检测波长;流动相是否相溶;流动相是否干净等问题,然后针对问题一一排除。
    2基线漂移
    一般说来, 机器刚启动时, 基线容易漂移, 对紫外检测器来说,大概需要0.5h的平衡时间, 如果在实验过程中发现基线漂移, 则可考虑以表3所列基线漂移的可能原因及解决方法。
    表3.基线漂移可能原因及解决方法

    3. 异常峰形
    异常的色谱峰指的是色谱图中无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。这要根据具体情况进行分析,然后有针对地采取不同的解决方法。异常峰形及其分析(见表4)。
    表4.异常峰形的分析

    来源:实验与分析微信
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  • dahua1981

    第1楼2015/08/07

    应助达人

    好资料啊,值得拥有

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  • wsy18

    第2楼2015/08/07

    我只用过uv检测器。

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  • dahua1981

    第3楼2015/08/08

    应助达人

    这个最便宜

    wsy18(wsy18)发表:我只用过uv检测器。

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  • wsy18

    第4楼2015/08/08

    但是最常用。

    dahua1981(dahua1981) 发表:这个最便宜

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  • 999youran

    第5楼2015/08/10

    感谢楼主分享好资料

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