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求助:关于紫外含量稀释倍数计算

紫外可见分光光度计(UV)

  • 求助:最近刚到一个公司,突然发现他们的紫外检验记录的计算和自己以前的不一样!现在向各位前辈求证,看哪种算法正确,关于某产品药典要求是这样子的:

    对照品溶液的制备 取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖60mg,精密称定,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含无水葡萄糖0.6mg)。

    标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml,分别置50ml量瓶中,各加水至刻度,摇匀。分别精密量取上述溶液2ml,置具塞试管中,各精密加4%苯酚溶液1ml,混匀,迅速精密加入硫酸7ml,摇匀,置40℃水浴中保温30分钟,取出,置冰水浴中放置5分钟,取出,以相应试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅴ A)在490nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。

    测定法 取金樱子肉粗粉约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加水50ml,称定重量,静置1小时,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液1ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取25ml,置50ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取2ml,置具塞试管中,照标准曲线的制备项下的方法,自“各精密加4%苯酚溶液1ml"起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中金樱子多糖的重量(μg),计算,即得。


    他们的计算:
    对照品浓度

    0.6

    mg/ml

    标准曲线
    取样量(ml)

    0.5

    1

    1.5

    2

    2.5

    浓度C(mg/ml)

    0.012

    0.024

    0.036

    0.048

    0.06

    吸光度A

    0.095

    0.198

    0.322

    0.438

    0.562

    标准线性是:y=9.7833x-0.0292
    供试品:m1=0.5014g m2=0.5008 水分:10.1%
    吸光度:A1=0.203 A2=0.201
    含量1=(0.203+0.0292)/9.7833*50/2*100/25*50/1/0.5014/1000/(1-10.1%)*100=26.3671%
    含量2=(0.201+0.0292)/9.7833*50/2*100/25*50/1/0.5008/1000/(1-10.1%)*100=26.1316%

    平均值=26.2293%
    我原来公司计算是这样的:
    对照品浓度

    0.6

    mg/ml

    标准曲线
    取样量(ml)

    0.5

    1

    1.5

    2

    2.5

    浓度C(mg/ml)

    0.006

    0.012

    0.018

    0.024

    0.03

    吸光度A

    0.095

    0.198

    0.322

    0.438

    0.562


    标准线性是:y=19.567x-0.0292
    供试品:m1=0.5014g m2=0.5008 水分:10.1%
    吸光度:A1=0.203 A2=0.201
    含量1=(0.203+0.0292)/19.567*50*100/25*50/1/0.5014/1000/(1-10.1%)*100=26.3265%
    含量2=(0.201+0.0292)/19.567*50*100/25*50/1/0.5008/1000/(1-10.1%)*100=26.1311%

    平均值=26.2288%
    请问哪个计算是正确的???


    你们一般是怎么算的?有些人有说方法不对,可这个检测方法是2010年版药典一部“金樱子”含量检测项下要求的检测方法也!有些人有说标准曲线溶液稀释倍数计算错误,说是还有除以10,即7+1+2=10ml,但我个人认为不同介质液体的体积混合,总体积不能是简单的个成分体积简单相加也,又有些人说标准曲线浓度有问题,不能是0.0012mg/ml 因为太小了,检测不出!现在我蒙了!为何都是药典要求这方法,为何大家的看法都不一样呢?到底是怎么计算才对呢???求解
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  • 可乐20150313

    第1楼2015/11/09

    下面那个是对的。取0.5毫升的算法:0.06*0.05=0.3,0.3/50=0.006.你配置的葡萄糖是0.6mg/ml.那么0.5毫升含葡萄糖就是0.3mg.然后0.3mg又溶解在50ml 容量瓶中,不就是0.006mg/ml啊。

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